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茜素红对已骨化骨骼的染色有较强的特异性,很容易将其显示成红色或紫红色,自1897年Schultze采用茜素红对骨骼进行单染以来,该方法已成为研究骨骼畸形的常用方法。根据阿利新蓝可使软骨中硫酸软骨素、硫酸角质素等主要成分呈现蓝色的特点,Dawson等改进了单染法,采用茜素红和阿利新蓝对骨骼标本进行双重染色,使之成为研究骨和软骨发育较为直观的方法。