【摘 要】
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慢病毒表达载体具有感染宿主广和基因组整合效率高的优点,因此在转基因动物的制备中得到广泛应用。本研究构建了含有红色荧光和绿色荧光的慢病毒表达载体,用磷酸钙转染法将三
【基金项目】
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国家自然科学基金（No.31050011）, 浙江省重大科技专项（No.2010C12006）共同资助
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慢病毒表达载体具有感染宿主广和基因组整合效率高的优点,因此在转基因动物的制备中得到广泛应用。本研究构建了含有红色荧光和绿色荧光的慢病毒表达载体,用磷酸钙转染法将三质粒慢病毒载体转染293T细胞,转染效率达72%,降低了慢病毒的生产成本。在进行慢病毒的浓缩与纯化时,通过超速度离心和超滤相结合的方法,在150mL的慢病毒原液中经纯化后得到80μL效价为2.38×109TU/mL的慢病毒颗粒。获得的高效价双荧光慢病毒表达载体可为后续双基因转基因动物的制备提供可靠的制作途径与检测基础。
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