【摘 要】
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目的 探讨希佩尔-林道抑癌基因(VHL)对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及相关作用机制.方法 收集在本院进行切除手术的35例宫颈癌患者的宫颈癌组织及对应癌旁组织,体外培养HaCaT、HeLa、SiHa、C33A、MS751细胞,将 HeLa 细胞分为对照组、pcDNA 组(转染 pcDNA)、pcDNA VHL 组(转染 pcDNA VHL)、pcDNA VHL+pcDNA低氧诱导因子-1α(HIF-1α)组(转染pcDNA VHL、pcDNA HIF-1α).实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测
【机 构】
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南方科技大学医院妇科,广东深圳518000
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目的 探讨希佩尔-林道抑癌基因(VHL)对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及相关作用机制.方法 收集在本院进行切除手术的35例宫颈癌患者的宫颈癌组织及对应癌旁组织,体外培养HaCaT、HeLa、SiHa、C33A、MS751细胞,将 HeLa 细胞分为对照组、pcDNA 组(转染 pcDNA)、pcDNA VHL 组(转染 pcDNA VHL)、pcDNA VHL+pcDNA低氧诱导因子-1α(HIF-1α)组(转染pcDNA VHL、pcDNA HIF-1α).实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测HeLa细胞中VHL、HIF-1α mRNA表达,蛋白印迹(WB)法检测细胞及组织中VHL、HIF-1α蛋白表达,CCK-8法检测HeLa细胞增殖,Transwell法检测HeLa细胞迁移、侵袭.结果 与癌旁组织相比,宫颈癌组织中VHL蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),HIF-1α蛋白表达水平显著升高(P＜0.05).与HaCaT细胞相比,HeLa、SiHa、C33A、MS751细胞中VHL蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),HIF-1α蛋白表达水平显著升高(P＜0.05),其中,HeLa细胞中VHL、HIF-1α蛋白表达变化更明显.与pcDNA组相比,pcDNA VHL组HeLa细胞中VHL mRNA及蛋白表达水平显著升高(P＜0.05),HIF-1α mRNA表达水平差异无统计学意义(P＞0.05),HIF-1α蛋白的表达水平及HeLa细胞OD值、迁移细胞数、侵袭细胞数显著降低(P＜0.05);与pcDNA VHL组相比,pcDNA VHL+pcDNA HIF-1α组HeLa细胞中VHL mRNA及蛋白表达水平差异无统计学意义(P＞0.05),HIF-1α mRNA及蛋白的表达水平、HeLa细胞OD值、迁移细胞数、侵袭细胞数显著升高(P＜0.05).结论 VHL过表达后可通过抑制HIF-1α蛋白表达,进而抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖、迁移及侵袭行为.
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