白细胞介素1受体1和白细胞介素6双基因敲除小鼠的构建及基因型鉴定

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目的

通过白细胞介素1受体1 (interleukin-1 receptor1, IL-1R1)和白细胞介素6 (interleukin-6,IL-6)单基因敲除小鼠杂交繁育以获得IL-1R1-/-IL-6-/-纯合子小鼠。

方法

将IL-1R1+/+IL-6-/-和IL-1R1-/-IL-6+/+小鼠杂交,并进行子代自交繁殖,提取基因组DNA,PCR鉴定其自交子代基因型。并用免疫印迹法(Western blot)、酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)确定自交小鼠后代基因型。

结果

PCR鉴定成功获得基因型为IL-1R1-/-IL-6-/-的双基因敲除小鼠。Western blot结果显示,双基因敲除小鼠未见IL-1R1的蛋白条带;ELISA结果提示,双基因敲除小鼠的IL-6细胞因子为阴性。

结论

成功获得IL-1R1-/-IL-6-/-双基因敲除纯合小鼠,为深入研究IL-1R1、IL-6基因相关的炎症疾病动物模型奠定基础。

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