慢病毒介导稳定过表达β-catenin可促进间充质干细胞的增殖和迁移

来源 :中国组织工程研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hongyin_wangyi
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背景:β-catenin是wnt/β-catenin信号通路中最关键的信号分子,参与调控细胞增殖、分化以及组织自我修复的平衡。目的:建立慢病毒介导的过表达β-catenin基因的大鼠间充质干细胞株,观察β-catenin基因对间充质干细胞增殖和迁移的影响。方法:构建靶向过表达β-catenin基因的慢病毒载体pLV-catenin-RFP,采用人胚肾上皮细胞293T进行包装,收集、浓缩病毒,感染间充质干细胞株,经过嘌呤霉素加压筛选,建立稳定过表达β-catenin基因的间充质干细胞。通过实时荧光定量PCR、细胞生长曲线、MTT实验、Transwell体外细胞迁移实验研究稳定过表达β-catenin基因对间充质干细胞增殖和迁移的影响。结果与结论:成功包装靶向过表达β-catenin基因的慢病毒载体pLV-catenin-RFP,建立稳定过表达β-catenin基因的间充质干细胞。与空载对照pLV-RFP组和正常间充质干细胞组相比,实时荧光定量PCR证实,慢病毒pLV-catenin-RFP组mRNA表达明显增高(P<0.05);MTT和生长曲线显示pLV-catenin-RFP组使细胞倍增时间缩短(P<0.05),增殖能力增加;细胞迁移实验显示pLV-catenin-RFP组使细胞迁移能力增加(P<0.01)。结果可见慢病毒介导稳定过表达β-catenin基因能使间充质干细胞的增殖能力及迁移能力增强。
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