【摘 要】
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目的：对铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa,PA）的阻遏蛋白LexA进行基因克隆、重组表达及蛋白纯化。方法：采用PCR法从PAO1株基因组中扩增出1 086 bp的LexA基因,将此基因片段插
【机 构】
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暨南大学附属第一医院临床实验中心,第三军医大学临床微生物免疫教研室
【基金项目】
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广东省医学技术科研基金(2006B088)资助项目
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目的：对铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa,PA）的阻遏蛋白LexA进行基因克隆、重组表达及蛋白纯化。方法：采用PCR法从PAO1株基因组中扩增出1 086 bp的LexA基因,将此基因片段插入到表达载体pET32 a（＋）上,并在大肠杆菌BL21（DE3）中表达。包涵体洗涤后用8 mol/L尿素溶解,以镍离子亲合柱层析作为第1步纯化,Superdex75凝胶过滤层析作为第2步精细纯化,反相高相液相色谱法（HPLC）测定蛋白的浓度。结果：LexA以包涵体形式表达,表达量为45%,经
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