鉴别伪狂犬病病毒野毒与疫苗毒荧光定量PCR方法的建立

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根据猪伪狂犬病病毒(PRV)gH、gE基因的序列,设计了两对引物及其对应的TaqMan探针,通过对引物、探针、Mg2+的浓度和样品DNA提取方法等进行优化,建立了鉴别PRV野毒与疫苗毒感染的荧光定量PCR方法。该方法线性范围为10^1-10^8拷贝/μL,达8个数量级,灵敏度可达10^1拷贝/μL,比常规PCR高100倍。用此方法对60份疑似组织样品进行检测,并与血清中和试验、常规PCR相比较,结果显示该方法具有快速、灵敏、特异、重复性好和能对样品进行定量检测等优点,并且该法以闭管的模式操作,减少了后续步
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