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目的 建立并优化糖尿病视网膜病变(DR)血清蛋白质组研究的双向凝胶电泳技术.方法 收集确诊为无明显视网膜病变和增生型糖尿病视网膜病变(PDR)的糖尿病患者各15例,每例患者空腹抽取肘正中静脉血3 mL,通过自凝和二次离心提取血清,-80℃保存,采用同类型患者血清混合叠加共同差异蛋白质的方法进行优化,应用Merck去除试剂盒去除血清蛋白、IgG等高丰度蛋白质,运用pH3-10非线性胶条进行双向凝胶电泳,采用与质谱方法兼容的硝酸银染色,再运用Image Scanner采集图像并进行分析.结果 优化的双向凝胶电泳图谱聚焦性好、重复性高.与无明显视网膜病变患者相比,PDR患者血清蛋白质丰度上调2倍以上的差异点40个,丰度下调2倍以上的差异点21个,新出现的蛋白质差异点20个,消失的蛋白质差异点27个.结论 优化的双向凝胶电泳能够发现PDR患者和无明显视网膜病变患者血清存在明显的蛋白质组差异。