盐单胞菌DSM 16354T中新型耐盐基因的克隆及解析

来源 :中国生物工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanbing5
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:嗜盐菌分布广泛且适应能力极强,为加强对嗜盐菌耐盐机制的探索与研究,从盐单胞菌Halomonas alkaliphila DSM 16354T中筛选出潜在的与耐盐有关的基因,对其进行生物信息学分析,并验证相关蛋白的生理功能.方法:利用基因文库筛选和功能互补相结合的方法,通过与大肠杆菌(Escherichia coli)盐敏感缺陷株KNabc(△nhaA、△nhaB、△chaA)的耐盐功能互补实验,筛选出具有耐盐功能的蛋白编码基因,并通过荧光猝灭恢复实验测定蛋白的逆向转运活性以及底物亲和力.结果:筛选得到两个具有耐盐功能的蛋白编码基因,生物信息学分析结果表明该基因编码来自于 DUF1538(domain of unknown function with No.1538 family)家族功能未知的膜蛋白,分别命名为duf1和duf2.系统发育树分析结果表明,来自盐单胞菌DSM 16354T中的DUF1、DUF2属于一个独立的分支,预测这两个蛋白可能是DUF1538家族转运蛋白的新成员.对DUF1和DUF2的生理功能进行分析,发现duf1和duf2单独表达时均不具有耐盐碱能力,而共同表达时则表现出显著的耐盐碱功能,表明DUF1和DUF2两个亚基共同支持了蛋白的耐盐碱功能.蛋白的逆向转运测定活性结果表明双组份蛋白DUF1-2具有Na+(Li+、K+)/H+逆向转运活性.结论:筛选得到的基因duf1和duf2共同表达时具有盐碱耐受功能以及逆向转运蛋白活性,这为筛选出新的DUF1538家族转运蛋白基因和进一步探究DUF1538家族转运蛋白功能奠定了基础.
其他文献
勘查区位于北祁连弧盆系-白银火山弧单元-早古生代大洞沟岛弧褶皱带内.矿区地层主要为寒武系中统香毛山组,区内构造受控于石青硐-二道湾-白银厂深大断裂北东侧的次级断裂,及其北侧发育的次级褶皱大井子沟复式向斜,具有多期次构造变形及构造的叠加特征,大井子沟复式向斜东南翼为青牛沟金矿产出位置.金矿体严格受北西西向断裂破碎带控制,多组断裂交汇复合部位为成矿有利地段.区内的酸性侵入岩对金的成矿作用提供了热源及一定的矿源,脉岩以石英脉为主,脉岩引起的局部地热场的异常,为成矿提供热源,促成金成矿物质成分的活化、迁移和再富集
铝挤压过程中对于模具能否挤压出合格的型材,主要影响因素是型材截面各部分在稳定挤压过程中的流速,本文重点研究分析流速场,采用目前国内外专业用于挤压模具仿真软件QForm-extrusion,对挤压模具进行模拟分析和验证,观察铝合金在模具的流动情况,能够提前发现模具设计中的缺陷,从而优化模具设计方案.本文的研究方法大大缩短了产品的交货期,提高了产品的合格率,具有一定的实际应用价值.
Following dental implantation,the characteristic bacterial milieu of the oral cavity may lead to peri-implant inflammation,which can negatively impact osseointegration and cause implant failure.To improve soft tissue sealing around the implant,enhance oss
文章主要对甘肃省天水市寺沟门金矿矿石特征及金的赋存状态进行了论述,表明寺沟门金矿矿石类型为中硫化物高砷金铅矿石.矿石构造简单,以团块状、网脉状构造为主,矿石主要结构有半自形-自形粒状结构、它形粒状结构、包含结构、固溶体分离结构等.矿石中矿物组成比较简单.金主要赋存在中硫化物高砷金铅矿石中,金分布不均匀.金的赋存状态有五种类型:粒间-裂隙金、粒间金、裂隙金、包裹金和分散金.
连续热镀锌生产线锌液成分在线检测可为生产高表面镀锌板提供可靠保障.本文介绍了脉冲激光式在线锌液成分检测仪的原理、功能、应用效果及常见问题的处理措施.该系统采用脉冲激光技术,实现对锌锅内铝、铁及部分微量元素的在线检测,维护成本低,在实际应用中表现出了良好的稳定性和实用性,在某公司冷轧厂镀锌线得到成功应用.
黄原胶(xanthan gum)是由黄单胞菌属(Xanthiomonas)产生的一种胞外多糖,其凭借优越的流变性和稳定性被广泛应用于食品、石油、农业等行业.目前黄原胶的合成途径已经被阐明,其研究主要集中在如何通过分子调控影响其合成及改性以适应于不同行业需求.通过对黄原胶的一级和二级结构、流变性及稳定性、生物合成途径的介绍,综述了黄单胞菌属黄原胶的生物合成分子调控研究进展.主要结论如下:现有的分子调控研究集中于对黄原胶合成途径中各阶段关键基因、信号分子及其他因子的调控;在黄原胶前体合成阶段,可针对葡萄糖转化
索尔库都克铜矿区具较好的找矿前景,开展索尔库都克铜矿矿床成因分析工作十分必要.硫同位素样品显示以岩浆硫为主;稀土元素特征反映含矿溶液改造安山质岩石的特征;氢、氧、碳同位素特征推测本矿床具有与辉石闪长岩有关的热液迭加交代的特征;矿物包体测温成果显示符合一般矽卡岩矿床的温度变化规律.综合上述矿床成因的多种信息,分析得索尔库都克铜矿矿床成因类型属次火山热液型层控型.
酿酒酵母广泛应用于食品、酿造、化工、医药等领域.基于已建成投产或工业示范化生产的酿酒酵母生产线,回顾酵母生物质制造产业的发展历程和关键技术;综述酵母生物质在酿酒行业的应用,酵母生物质用于开发和制造功能性食品和食品添加剂的进展;总结酵母细胞工厂的发酵生产优势,介绍酿酒酵母制造大宗化学品、天然产物和生物燃料等产品的产业化进展;为生物制造从实验室走向工业化生产提供参考.
目的:通过对尖孢镰刀菌中Folprp4基因的鉴定,揭示其在尖孢镰刀菌中的功能及致病相关性.方法:基于同源重组原理,根据测定出的Folprp4基因序列,应用Split-Marker重组技术构建含有潮霉素抗性基因(hph)的基因缺失盒.将基因缺失盒经PEG介导转化到野生型原生质体中,在含有潮霉素B的TCC培养基上筛选转化子,通过PCR正负筛查获得Folprp4基因缺失突变株(AFolprp4).构建含有Folprp4基因的载体pZDH1,并将其转化到敲除突变体中进行互补测验.结果:与野生型(hm)和异位插入突
本文以韧性断裂细观力学分析的方法分析了韧性断裂的机理,以及韧性断裂过程各个阶段的特征.通过压力容器爆破实验,分析爆破口宏观及微观特征.总结了引起压力容器韧性断裂的常见原因,通过检验案例,分析检验过程中如发现压力容器存在鼓包现象,通过韧性断裂细观力学分析的原理对压力容器开展定期检验.