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目的：利用培养基覆盖二维薄层色谱生物自显影技术（2D-TLC bioautography）快速检测、追踪金钱松内生真菌抗细菌活性成分。方法：以二维薄层色谱将金钱松内生真菌代谢产物样品展开,以枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）为指示菌,氯化三苯四氮唑（TTC）为显色剂,采用培养基覆盖生物自显影技术对其抗细菌活性成分进行检测、追踪。结果：该方法展开系统筛选简单,抑菌斑位置准确、斑点清晰,其优化条件为：以乙酸乙酯：正己烷（3：7）为弱极性展开系统,甲醇：二氯甲烷（1：9）为强极性展开系统,用20