【摘 要】
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目的 基于慢病毒介导的转基因方法制备荧光素酶(Luc)转基因小鼠.方法 制备携带Luc基因的慢病毒,将其注入小鼠单细胞受精卵卵周隙以感染受精卵,然后将胚胎移植进假孕母鼠体内
【机 构】
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南方医科大学肿瘤研究所,广东广州,510515;南方医科大学肿瘤研究所,广东广州510515;南方医科大学比较医学研究所暨实验动物中心,广东广州510515
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目的 基于慢病毒介导的转基因方法制备荧光素酶(Luc)转基因小鼠.方法 制备携带Luc基因的慢病毒,将其注入小鼠单细胞受精卵卵周隙以感染受精卵,然后将胚胎移植进假孕母鼠体内以获得仔鼠,应用小动物活体成像仪及PCR等在蛋白和DNA水平上筛选和鉴定Luc转基因小鼠.结果 移植慢病毒隙感染后的成活胚胎63枚.将其移植至3只假孕母鼠,其中2只怀孕,共生仔鼠11只；利用小动物活体成像仪检测Luc表达,在蛋白水平证实11只F0代中,3只(命名为S1、S2、S3)表达Luc；DNA水平检测证实,3只Luc阳性小鼠的基因组中整合有外源转基因Luc.此外,Luc转基因首建鼠基因组中整合的Luc转基因可稳定遗传至下一代,并能正常表达.Luc转基因小鼠主要脏器如睾丸、肾脏、胃、肠、肺、脑、胸腺、肝脏和心脏等均可见Luc信号,但不同脏器间Luc强度有差异.结论 成功制备Luc报告基因转基因小鼠.
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