胶原酶阶梯消化法体外培养成骨细胞的研究

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目的 采用胶原酶阶梯消化法进行鼠颅盖骨体外培养。方法将新生的健康Wistar大鼠处死,无菌条件下取出颅骨,剔净,粉碎漂洗。依次用1.0%、0.5%及0.1%的Ⅰ型胶原酶分3次对颅骨进行消化。制成细胞悬液,接种培养,然后进行细胞内碱性磷酸酶(ALP)染色,最后将成骨细胞纯化、鉴定。结果 纯化处理的培养皿中,ALP染色阳性区域不少于95%,而对照皿中,不超过62%。结论 胶原酶阶梯消化法培养的成骨细胞具有典型的成骨细胞特征,且成份单一。
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