【摘 要】
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目的：建立重组人磷脂爬行酶1（hPLSCR1）原核表达及纯化工艺。方法：PCR扩增hPLSCR1编码基因并连接到原核表达载体pET-28a,转化大肠杆菌BL21（DE3）并进行诱导表达,Western印迹鉴定所表
【机 构】
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河南中医学院,军事医学科学院放射与辐射研究所
【基金项目】
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国家传染病防治重大专项（2008ZX10002-011）, 国家自然科学基金（30625041）
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目的：建立重组人磷脂爬行酶1（hPLSCR1）原核表达及纯化工艺。方法：PCR扩增hPLSCR1编码基因并连接到原核表达载体pET-28a,转化大肠杆菌BL21（DE3）并进行诱导表达,Western印迹鉴定所表达蛋白;优化表达条件后,Ni2＋柱亲和层析纯化重组蛋白。结果：构建了pET-28a-PLSCR1重组质粒,诱导表达后,经SDS-PAGE分析目的蛋白的表达量达32%,Ni2＋金属螯合法纯化目的蛋白后纯度达到95%以上,Western印迹验证了融合蛋白的特异性。结论：建立了高效稳定的His-PLSC
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