抗IgE中和抗体表位的筛选和鉴定

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目的:对噬菌体线性7肽库进行筛选,得到诱发机体产生抗IgE中和抗体的IgE表位肽.方法:以抗IgE抗体为靶,筛选噬菌体线性7肽库,双夹心ELISA鉴定阳性克隆结果:ELISA鉴定随机挑选的经3轮筛选后所得48个噬菌体克隆,其中15个克隆显示与抗IgE抗体有较强的结合能力,序列测定得到氨基酸序列为:DHIDMGL;DHMWLGL;DHQD AGF;DHMDQNL.竞争性ELISA结果显示4个序列均能与IgE竞争性结合抗IgEmAb,MAP点杂交结果显示筛选得到的多肽能与抗IgE抗体特异性结合.结论:经筛选得到的7肽序列具有相似的骨架区,并与IgE的CH3区高度同源.初步验证这些噬菌体展示肽能与抗IgE中和抗体特异性结合,为IgE相关多肽疫苗的研究提供了依据.
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