【摘 要】
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目的研究程序性细胞死亡因子4(PDCD4)对肾癌细胞凋亡和信号转导与转录因子3(STAT3)信号通路的影响。方法肾癌细胞RC-2中转染PDCD4过表达载体和空载体记为PDCD4组和空载体组,
【机 构】
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重庆市开州区人民医院泌尿外科,重庆市开州区人民医院病案统计室
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目的研究程序性细胞死亡因子4(PDCD4)对肾癌细胞凋亡和信号转导与转录因子3(STAT3)信号通路的影响。方法肾癌细胞RC-2中转染PDCD4过表达载体和空载体记为PDCD4组和空载体组,同时以不做转染的细胞作为对照组。在转染PDCD4过表达载体后的肾癌细胞培养液中添加STAT3抑制剂AG490记为AG490+PDCD4组,在不做转染的肾癌细胞培养液中添加STAT3抑制剂AG490记为AG490组。qRT-PCR和Western blot法分别测定细胞内PDCD4 mRNA和蛋白表达。用STAT3信号通路抑制剂处理肾癌细胞,MTT测定各组细胞存活率,流式细胞术测定各组细胞凋亡情况,Western blot测定细胞中STAT3、p-STAT3、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、裂解后的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(Cleaved PARP)蛋白水平。结果转染PDCD4过表达载体可以提高肾癌细胞中PDCD4 mRNA和蛋白水平,而转染空载体对细胞中PDCD4 mRNA和蛋白水平无显著影响。PDCD4组、AG490组肾癌细胞存活率明显降低,细胞凋亡明显增多,细胞内STAT3磷酸化水平降低,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。AG490+PDCD4组肾癌细胞存活率降低更多,细胞凋亡率进一步增加,细胞内的Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP蛋白水平增加,与PDCD4组、AG490组细胞相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。空载体组细胞存活率、凋亡率与对照组比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PDCD4可以通过降低肾癌细胞中STAT3激活水平诱导肾癌细胞凋亡。
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