松油烯4醇体内外诱导A549细胞自噬及抑制增殖作用

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目的研究松油烯4醇体内外抑制人非小细胞肺癌细胞株A549增殖及诱导自噬的作用。方法不同浓度松油烯4醇作用A549细胞后,应用MTT法检测抑制率及IC50;流式细胞仪检测细胞周期、凋亡、细胞内钙离子浓度变化;透射电镜观察作用前后细胞超微结构的变化。A549细胞移植瘤裸鼠药物连续腹腔注射10 d后分别测量各组移植瘤的平均体积和质量,观察药物的体内抑制肿瘤生长作用。用实时荧光定量PCR和Western blot法检测自噬相关基因BECN1和LC3的体内外表达情况。结果 MTT结果显示松油烯4醇作用于A549细胞24 h后,随着药物浓度升高抑制率逐渐升高,呈浓度依赖性(P<0.05),其24 h的IC50为0.067%(体积分数)。FCM检测结果显示,实验组细胞周期被阻滞在S期,实验组细胞总凋亡率均高于对照组(P<0.05),各实验组细胞内钙离子荧光强度均高于对照组(P<0.05)。电镜结果显示经松油烯4醇处理的A549细胞内自噬泡数量明显增加。实验组移植瘤平均瘤体积和平均瘤质量均低于对照组(P<0.05),高、低剂量实验组抑瘤率分别为77.46%和53.33%。实时荧光定量PCR及Western blot结果显示BECN1和LC3蛋白及mRNA表达量上调(P<0.05)。结论松油烯4醇在体内外可诱导人非小细胞肺癌细胞株A549自噬并抑制其增殖。
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