【摘 要】
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目的：探讨蛋白质精氨酸甲基转移酶1（protein arginine methyltransferase 1,PRMT1）通过沉默信息调节因子1（silent information regulator 1,SIRT1）/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α（peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator-1α,PGC-1α）
【机 构】
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广州医科大学附属第五医院前沿医学交叉研究中心广州市加速康复腹部外科重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（No.81903381）； 广东省自然科学基金博士启动项目（No.2018A030310290）； 广州市科技计划项目（No.201905010004）;广州市科技计划项目（No.202102010085）；
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目的：探讨蛋白质精氨酸甲基转移酶1（protein arginine methyltransferase 1,PRMT1）通过沉默信息调节因子1（silent information regulator 1,SIRT1）/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α（peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator-1α,PGC-1α）信号通路对2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）小鼠肠屏障功能损伤的作用。方法：20只8周龄SPF级C57BL/6小鼠随机分为对照组（n=5）和实验组（n=15）；将采用链脲佐菌素和高脂饮食构建T2DM小鼠模型的实验组，随机分为T2DM组、T2DM+PRMT1抑制剂AMI-1（arginine methyltransferase inhibitor 1）组和T2DM+白藜芦醇（resveratrol,Resv）组，每组5只。将对数生长期的人结肠上皮NCM-460细胞分为对照组、高糖（HG;50 mmol/L葡萄糖）组、HG+AMI-1组和HG+Resv组。采用PRMT1小干扰RNA（PRMT1-siRNA）和正常对照siRNA（non-targeting siRNA,NT-siRNA）转染NCM-460细胞后，HG处理48 h，分为NT-siRNA组、NT-siRNA+HG组、PRMT1-siRNA组和PRMT1-siRNA+HG组。采用口服葡萄糖耐量试验检测血糖；总胆固醇（total cholesterol,TC）和甘油三酯（triglyceride,TG）测定试剂盒（COD-PAP法和GPO-PAP法）以及高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C）检测试剂盒（微板法）检测血清TC、TG和HDL-C水平；异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate,FITC）-葡聚糖法检测肠道通透性；Western blot法检测结肠组织和NCM-460细胞PRMT1、SIRT1、PGC-1α、ZO-1（zonula occludens-1）和occludin的表达。结果：与正常对照组相比，T2DM组模型小鼠血清葡萄糖、TG和TC水平升高，HDL-C水平降低，血清FITC-葡聚糖水平升高，结肠组织中PRMT1蛋白表达升高，SIRT1和PGC-1α及ZO-1蛋白表达均下降（P＜0.05）；与T2DM组模型小鼠相比，T2DM+AMI-1和T2DM+Resv组中小鼠的结肠长度均增加，血清FITC-葡聚糖水平降低，结肠组织中PRMT1蛋白表达降低，ZO-1、occludin和SIRT1及PGC-1α蛋白表达上升（P＜0.05）。与对照组相比，HG处理后NCM-460细胞中PRMT1蛋白表达升高，SIRT1、PGC-1α和ZO-1及occludin蛋白表达下降（P＜0.05）；与HG组相比，HG+AMI-1组和HG+Resv组细胞中PRMT1蛋白表达降低，SIRT1、PGC-1α和ZO-1及occludin蛋白表达升高（P＜0.05）；与NT-siRNA组相比，NT-siRNA+HG组NCM-460细胞的PRMT1蛋白表达上升，SIRT1、PGC-1α和ZO-1及occludin蛋白表达均显著降低（P＜0.05）；与PRMT1-siRNA组相比，PRMT1-siRNA+HG组的SIRT1、PGC-1α和ZO-1及occludin蛋白表达并未发生改变。结论：PRMT1可能通过抑制SIRT1/PGC-1α信号通路损伤T2DM小鼠肠屏障功能。
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