蚜虫分泌物蜜露的收集方法

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  摘要:蚜虫蜜露是蚜虫的分泌物,是造成环境公害性煤污病的主要因素之一,同时也可以将其制成害虫的引诱剂,然而,由于蚜虫蜜露含量少,收集相对困难,因此,目前研究蚜虫蜜露的文献并不多。文章通过检索了相关的专利、文献。介绍了不同的蚜虫的分泌物的收集方法。通过对比各种蚜虫的分泌物蜜露的收集方法,建议蜜露的收集方法应密切联系蜜露收集后的用途来选择,考虑蜜露收集时间、环境以及蜜露本身的挥发物易变性的特点,以提高蜜露收集水平。
  关键词:蚜虫;分泌物;蜜露
  一、 引言
  蚜虫、木虱及介壳虫等半翅目昆虫吸取了植物的汁液后,经过消化系统的作用,吸取其需要的蛋白质和糖分,并把多余的糖分和水分排泄出来。排泄出来的含糖液体即为蜜露。蜜露可诱发煤污病以及其它林木的病害,对林木生长和环境造成很大的危害[1]。蚜虫蜜露中含糖量很高,所以营养价值也很高,是蚂蚁、蜜蜂等昆虫的重要食物来源。一些蜜蜂以蜜露为原料制作甘露蜜。蚜虫蜜露作为一种全新的动物糖类产品,具有巨大的潜在开发价值[2]。近年来,蜜露逐渐被人们重视,其收集方法也呈现多样化。从国内外看,根据对蜜露的不同研究以及通过蜜露对蚜虫、蚜虫天敌的研究,其收集方法主要根据不同的寄主植物、蜜露的需求量以及使用蜜露的目的的不同而不同。
  通过检索得到对不同蚜虫分泌蜜露的研究,主要有水稻(刘光杰等 1993;曾铮 2012; 黄建利等 2013)、棉花(张克斌 1982;杨益众 2005; 周晓静 2012)、茶树(韩宝瑜2000; 韩宝瑜2007)、小麦(郭贵明1993;刘勇 2003)、烟草(任广伟 2006)、侧柏(王鸿艳 2013;王鸿艳 2014)等寄主上的蚜虫分泌蜜露进行研究;而围绕蜜露进行研究主要在成分分析(刘光杰等 1993;韩宝瑜2000; 杨益众 2005; 刘万学 2007; 曾铮 2012; 黄建利等 2013)、蜜露中细菌组成多样性(王鸿艳 2013)、对天敌的引诱(韩宝瑜2000; 韩宝瑜2007)及天敌的行为反应(刘勇 2003)、蜜露分泌节律(韩宝瑜2007)及分泌量(郭贵明1993; 任广伟 2006)等方面。目前,没有专门针对竹类蚜虫蜜露的收集方法。
  二、蚜虫蜜露收集方法
  1.套parafilm小袋或用夹笼罩住植物
  寄主为水稻,蜜露的收集方法是先将蚜虫放入parafilm小袋中,再将parafilm小袋套在水稻的主分蘖上,蚜虫吸食水稻汁液并分泌蜜露,经过24h后,用微量注射器进行小袋内的蜜露的收集[3]。曾铮等(2012)、黄建利等(2013)也采用类似方法收集水稻上蚜虫分泌的蜜露。Faria等(2008)在收集寄主为大麦的蚜虫蜜露时,利用夹笼将感染蚜虫的大麦封起来,每隔一周收集一次蜜露。夹籠留在植物上24小时。然后置于室温环境中24小时,使用微毛细管收集蜜露。再将植物放置在新的玻璃纸袋中,并将培养皿放置在植物底部24小时。蜜露从培养皿中收集,同样使用微毛细管收集蜜露[11]。此类方法适用在植株较小且植株正常生长时,蚜虫集中分布在同一区域。此类方法的优点是植株正常生长,植株鲜活,减小了环境的变化对蚜虫的取食和蜜露的分泌的影响。且袋子或夹笼与玻璃板相比能够一定程度上避免蜜露受到外界的污染,同时能够一定程度上减少蜜露中水分及其它成分的蒸发。但此类方法收集蜜露由于收集时间太长,蜜露的收集量、挥发物成分仍然会发生较大的变化,且蜜露受到污染的可能性仍然较大。
  2.用parafilm膜、玻璃板、铝箔纸或培养皿等承接
  2.1.寄主植物叶片离体
  寄主为棉花时,通常使用离体叶片饲养蚜虫,方便蜜露的检测与收集。在棉叶下方放置parafilm膜[4]或玻片[5]来收集蜜露。也有制作培养基于一次性的塑料杯中,将棉叶剪成直径为3cm的圆片,贴在培养基的表面,接种蚜虫。将塑料杯倒置放在保鲜膜上,蚜虫分泌的蜜露将滴落在膜上。24h后吸取保鲜膜上所聚集的蜜露[6]。寄主为小麦时,将制备好的滤纸放在同样大小且干燥的培养皿中,将麦叶叶面用透明胶带封严,叶背接种蚜虫,麦叶横放在培养皿口上,蚜虫分泌蜜露将掉落在滤纸上[10]。此类方法方便、能够很好地承接蜜露。但由于植物叶片离体,离体后的叶片正常情况下会快速萎焉,对蚜虫的正常的取食影响较大,因此对蚜虫分泌蜜露的分泌节律和蜜滴大小会造成较大的影响。用parafilm膜、玻璃板、铝箔纸或培养皿等直接承接蜜露,操作方便,易于收集,且能够很好地观察到蜜露的分泌现象,但此类方法不能够避免外界对蜜露的污染且不能避免蜜露中水或其他成分的挥发。
  2.2.寄主枝条离体培养或未离体
  寄主为侧柏时,将感染柏大蚜的寄主枝条的形态学下端插入盛水的三角瓶中,三角瓶口外围套上适当大小的灭菌铝箔纸,蜜露掉落其上。观察蜜露分泌的情况并及时用灭菌的大针头和小枪头吸取蜜露[1]。寄主为茶树时,将接种若干头蚜虫的茶苗植于小烧杯,置玻璃板、培养皿、铝箔[7]或滤纸[8]于茶苗下承接蜜露。刘万学等(2007)在寄主植物叶片下放置一张铝箔纸, 48h后收集蜜露露斑[12]。任广伟等(2006)在研究被感染后的烟草植株对烟蚜蜜露排泄影响时,将指示滤纸铺设在蚜虫叶片的下方承接蜜露。一段时间转动一次指示滤纸。最后统计各处理每个时段的烟蚜蜜露排泄量[13]。此类方法相比于离体叶片,保证了寄主的鲜活,能一定程度上减少对蚜虫取食及蜜露分泌的影响。
  3.一种专门的蚜虫保育箱
  汪鹏丞(2012)设计了一种专门的蚜虫保育箱,根据防止蚜虫外逃,蚜虫对灰色的负趋性以及对黄色或橙色的趋性,设计了一种厂房和一种两层的保育箱,厂房内墙都涂成银灰色,养殖蚜虫的保育箱内部涂成黄色或橙色。保育箱上层放置蚜虫以及蚜虫喜爱的食物。保育箱下层为蜜露收集室。蚜虫分泌蜜露排出体外后会直接落到下层蜜露收集室的托盘里,积满蜜露的托盘可随时更换[2]。   4.一种昆虫蜜露的收集及测定装置
  李帅(2015)设计了一种昆虫蜜露的收集及测定装置,一种包括收集瓶与培养皿的培养基,收集瓶内依次设有泥土、水。植物种植在培养基上并伸出培养基,并将蜜露采集装置设在培养基四周。蜜露采集装置为可转动的圆盘结构[14]。
  5.从蚜虫肛门直接收集
  Vo¨ lkl W等(1999)采用微毛細管直接从蚜虫肛门收集蜜露。Yao and Akimoto(2008)同样利用微毛细管直接从蚜虫身上采集蜜露。通过收集新分泌的蜜露,可以大大减少蜜露中水分的蒸发,可以获得更加精确的糖浓度[15]。
  6.用玻璃管套入枝条
  刘勇等(2003)用玻璃管套入蚜虫危害的小麦植株,然后平置玻璃管,蚜虫分泌蜜露掉落在玻璃管内部,以此收集蜜露[9]。此种方法与套袋收集相似,且种方法更能使蜜露尽量多的落在玻璃管中。但玻璃管中的蜜露在取出时比套袋收集更复杂。
  三、结论
  蜜露的收集方法因基于寄主植物的大小形态,收集蜜露的目的来选择收集方法。若收集蜜露用于成分分析,则应保证蜜露的纯度尽量高,避免选择用小袋、夹笼或直接承接的方法。可选择直接从蚜虫肛门收集的方法,但此方法耗时费力。若收集蜜露用于观察分泌节律或对天敌的影响,则可选用直接承接或用小袋罩住植株。总之,蜜露的收集方式多样,但并没有一种高效率的能够获取高纯度蜜露的方法。国内外蚜虫蜜露收集技术,还具有很大的空间。
  致谢:本论文得到了四川省大学生创新创业训练计划项目资助(蚜虫分泌物蜜露的成分分析:编号:201710649072)
  参考文献
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  [2] 汪鹏丞.专利,中国,2011100472935.[P].2012-8-29
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  [4] 周晓静等.河南农业大学学报,2012,(第1期):53-57.
  [5] 张克斌等.西北农林科技大学学报(自然科学版),1982,(第1期):49-60.
  [6] 杨益众等.昆虫学报,2005,(第4期)491-497.
  [7] 韩宝瑜等.生态学报,2007,(第9期)3637-3643.
  [8] 韩宝瑜等.生态学报,2000,(第3期)495-501.
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