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摘 要：目的：考察注射用复方氨苄西林钠的家兔体外抗菌特征。方法：体外抗菌考察单次和多次给家兔注射复方氨苄西林钠后，采集的家兔血浆对培养的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抗菌作用。结果：与注射用氨苄西林钠组相比，注射用复方氨苄西林钠大、中、小剂量组增强了氨苄西林钠对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌作用(p<0.05或p<0.01)。结论：与注射用氨苄西林钠组相比，注射用复方氨苄西林钠可增强氨苄西林钠的抗菌作用。
关键词：注射用复方氨苄西林钠；注射用氨苄西林钠；抗菌作用
中图分类号：R978.5 文献标识码：A 文章编号：1673-2197(2007)10-052-03
氨苄青霉素为半合成类抗生素，在临床上被广泛使用，但其口服给药生物利用率低，约50%被胃酸破坏，半衰期短(0.5～1h)，每日须多次给药，影响了氨苄青霉素的临床应用。氨苄青霉素类药物经肾小管分泌排泄，丙磺舒亦从肾小管分泌排泄，两者合用时，丙磺舒可竞争性抑制肾小管对氨苄青霉素的转运，使其滞留并再分布[1]，从而增大氨苄青霉素的血药浓度，延长了半衰期。基于上述机理，美国已经开发了复方氨苄青霉素/丙磺舒胶囊，并载入了美国药典，目前，国内已有同类产品(商品名：恩普洛)。但口服复方氨苄青霉素/丙磺舒胶囊时，氨苄青霉素仍易被胃酸破坏，生物利用率低，我室将该制剂改为注射制剂，希望避免此弊端，并与注射用氨苄青霉素钠作对照，考察了家兔体外法复方制剂的抗菌特征。
1 材料
1.1 工作检定菌
金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26 003]，大肠杆菌[CMCC(B)44 103]，均由陕西省药品检验所提供。
1.2 实验动物
家兔2.5～3.0kg，雌雄兼用，合格证号陕动证字第08-018号，由西安交通大学实验动物中心提供。动物饲养条件：室温26±3℃，相对湿度45%～55%。按性别分笼饲养，自由饮水，颗粒饲料和蔬菜搭配喂养。
1.3 试剂和试液
营养琼脂培养基，批号0204122，北京三药科技开发公司；抗生素检定培养基VI，批号030705，北京三药科技开发公司；抗生素检定培养基II，批号030526，北京三药科技开发公司。
1.4 仪器
ZY-300IV多功能微生物自动测量分析仪，北京先驱威锋技术开发公司；DK-型电子控温电热器；阳性菌培养室；K-01X隔水式电热恒温培养箱，长沙医疗器械厂；HH.B.500电热恒温培养箱；KT-1000W超声波清洗机，济宁科特超声电子有限责任公司；YXQ-WY21.600IIR电热卧式消毒锅，上海医用核子仪器厂。
1.5 药物
注射用复方氨苄西林钠，自制；注射用氨苄西林钠，哈尔滨制药二厂生产。
2 方法和结果
2.1 分组与给药
取家兔2.5~3.0kg，随机分为6组，每组5只：①注射用复方氨苄西林钠300mg·kg-1组；②注射用氨苄西林钠300mg·kg-1组；③注射用复方氨苄西林钠120mg·kg-1组；④注射用氨苄西林钠120mg·kg-1组；⑤注射用复方氨苄西林钠50mg·kg-1组；⑥注射用氨苄西林50mg·kg-1组。麻醉，分离颈总动脉，插管，取血0.5ml后①、②、⑤、⑥组给药，每h取血1次，共5次，③、④组间隔6h连续给药5次，首次给药和末次给药后每h取血1次，共5次。血液3000rpm离心10min，取上清液，置于-20℃冰箱，备用。
2.2 培养基和菌悬液的制备
普通培养基和两种细菌悬液等制备均按照抗生素微生物测定法进行：菌种复壮，钓取菌于琼脂斜面传一代，移种于5ml肉汤培养管种孵育18h，试验前经预试测定加入培养基(每500ml菌悬液培养基中加入大肠杆菌0.5ml；每500ml加入金黄色葡萄球菌5ml)。
2.3 双碟的制备
取平底双碟，注入加热的培养基。另取培养基加热溶化，放冷至48℃～50℃，加入金黄色葡萄球菌和大肠杆菌悬浮液5.5ml，放置水平台上冷却后，在每双碟中均匀安置4个牛津小杯，备用。
2.4 测定抑菌面积
用ZY-300IV多功能微生物自动测量分析仪测定经37℃温箱中培养8～12h后的培养基的抑菌圈，结果见表1～6。
表1显示注射用复方氨苄西林钠300mg·kg-1和注射用氨苄西林钠相比，各个时间点对培养的金黄色葡萄球菌的抑菌作用增强(P<0.05或P<0.01)。
表2显示注射用复方氨苄西林钠120mg·kg-1多次家兔给药与注射用氨苄西林钠120mg·kg-1多次给药相比，药后各个时间点采集的血浆对金黄色葡萄球菌的抑制作用增强(P<0.01)。
表3显示注射用复方氨苄西林钠50mg·kg-1与注射用氨苄西林钠50mg·kg-1相比，各个时间点对培养的金黄色葡萄球菌的抑制作用均有显著性的差异(P<0.05或P<0.01)，复方氨苄西林钠或氨苄西林钠均在采血4h后检测不到对金黄色葡萄球菌的抑制作用。
表4显示与注射用氨苄西林钠300mg·kg-1组相比，注射用复方氨苄西林钠组各个时间点的抑菌圈均高于注射用氨苄西林钠组的抑菌圈(P<0.01)。注射用氨苄西林钠300mg·kg-1组在3h后检测不到其抑菌作用，而注射用复方氨苄西林钠300mg·kg-1组仍可检测到抑菌作用。
表5显示与注射用氨苄西林钠组相比，注射用复方氨苄西林钠120mg·kg-1各个时间点对大肠杆菌的抑制作用均有显著性差异(P<0.01)。
表6显示，注射用复方氨苄西林钠50mg·kg-1与注射用氨苄西林钠均单次家兔给药，后者没有检测到对大肠杆菌抑菌作用。
3 结论与讨论
抗生素浓度越大，抑菌圈面积越大，浓度和抑菌面积正相关。我们设计实验以120mg·kg-1注射用复方氨苄西林钠连续5次给药，间隔6h，末次取血，得血浆，采用管碟法测量，并对比注射用复方氨苄西林钠和注射用氨苄西林钠两个组分别对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌作用，以抑菌圈的面积作监测指标，考察含有氨苄西林钠的血浆对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的作用。复方氨苄西林钠和氨苄西林钠组相比，各个时间点的抑菌作用均有显著性差异(P<0.01)，使得氨苄西林钠抑菌曲线右移；注射用氨苄西林钠120mg·kg-1多次静脉给药与注射用复方氨苄西林钠120mg·kg-1单次静脉给药相比，相同时间点采集的血浆对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌抑菌作用相当(P>0.05)；注射用复方氨苄西林钠120mg·kg-1单次静脉给药与注射用复方氨苄西林钠120mg·kg-1多次静脉给药相比，相同时间点采集的血浆对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌作用有显著性差异(P<0.05或P<0.01)，如末次注射用氨苄西林钠120mg·kg-1和注射用复方氨苄西林钠120mg·kg-1第1h取血浆的抑菌面积从1.5±0.1cm2增大到3.3±0.3cm2，P<0.01。可见注射用氨苄西林钠连续给药在家兔体内蓄积不显著，而注射用复方氨苄西林钠连续给药后蓄积明显。
参考文献：
[1] Kampann J. Effect of probenecid on the excretion of ampi-
cillin in human bile[J]. Br J Pharmacol，1973(47)：782-792.
[2] Whyatt PL . Bioavailability of 17 ampicilllin products [J]. J pharm Sci，1976(65)：652-659.
[3] 孔小东，蔡玉珉.丙磺舒对氨苄青霉素药物动力学影响[J].中国医院药学杂志，1987，7(1)：3-6.
Anti-infection effect of Compound Ampicillin Sodium for Injection in rabbits
He Lize1，2，Wang Peixian1，2
(1.Guangzhou Anjian Industry Development Co. Ltd，Guangdong，510420；
2.Pharmacy college of Xian Jiaotong University ，Xian ，Shannxi，710061)
Abstract：Objective：Test the antibiotics effect of Compound Ampicillin Sodium for Injection in rabbits. Methods：In vito，investigated Compound Ampicillin Sodium for Injection on antibiotics effect of staphylococcus and Escherichia coli after single and multiple dose administration with method of cup-plate method. Results：Compared with Ampicillin Sodium for Injection，Compound Ampicillin Sodium for Injection 300 mg·kg-1、120 mg·kg-1 and 50 mg kg-1 could significantly increase the concentration of ampicillin sodium in plasma of rabbits (p<0.05 or p<0.01) and increase the effect of bactericide action on staphylococcus and Escherichia coli. Conclusion：Compared with Ampicillin Sodium for Injection，Compound Ampicillin Sodium for Injection could increase the anti-infection effect of ampicillin sodium.
Key words：Compound ampicillin sodium；Ampicillin sodium for injection；Anti-infection effect
关键词：注射用复方氨苄西林钠；注射用氨苄西林钠；抗菌作用
中图分类号：R978.5 文献标识码：A 文章编号：1673-2197(2007)10-052-03
氨苄青霉素为半合成类抗生素，在临床上被广泛使用，但其口服给药生物利用率低，约50%被胃酸破坏，半衰期短(0.5～1h)，每日须多次给药，影响了氨苄青霉素的临床应用。氨苄青霉素类药物经肾小管分泌排泄，丙磺舒亦从肾小管分泌排泄，两者合用时，丙磺舒可竞争性抑制肾小管对氨苄青霉素的转运，使其滞留并再分布[1]，从而增大氨苄青霉素的血药浓度，延长了半衰期。基于上述机理，美国已经开发了复方氨苄青霉素/丙磺舒胶囊，并载入了美国药典，目前，国内已有同类产品(商品名：恩普洛)。但口服复方氨苄青霉素/丙磺舒胶囊时，氨苄青霉素仍易被胃酸破坏，生物利用率低，我室将该制剂改为注射制剂，希望避免此弊端，并与注射用氨苄青霉素钠作对照，考察了家兔体外法复方制剂的抗菌特征。
1 材料
1.1 工作检定菌
金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26 003]，大肠杆菌[CMCC(B)44 103]，均由陕西省药品检验所提供。
1.2 实验动物
家兔2.5～3.0kg，雌雄兼用，合格证号陕动证字第08-018号，由西安交通大学实验动物中心提供。动物饲养条件：室温26±3℃，相对湿度45%～55%。按性别分笼饲养，自由饮水，颗粒饲料和蔬菜搭配喂养。
1.3 试剂和试液
营养琼脂培养基，批号0204122，北京三药科技开发公司；抗生素检定培养基VI，批号030705，北京三药科技开发公司；抗生素检定培养基II，批号030526，北京三药科技开发公司。
1.4 仪器
ZY-300IV多功能微生物自动测量分析仪，北京先驱威锋技术开发公司；DK-型电子控温电热器；阳性菌培养室；K-01X隔水式电热恒温培养箱，长沙医疗器械厂；HH.B.500电热恒温培养箱；KT-1000W超声波清洗机，济宁科特超声电子有限责任公司；YXQ-WY21.600IIR电热卧式消毒锅，上海医用核子仪器厂。
1.5 药物
注射用复方氨苄西林钠，自制；注射用氨苄西林钠，哈尔滨制药二厂生产。
2 方法和结果
2.1 分组与给药
取家兔2.5~3.0kg，随机分为6组，每组5只：①注射用复方氨苄西林钠300mg·kg-1组；②注射用氨苄西林钠300mg·kg-1组；③注射用复方氨苄西林钠120mg·kg-1组；④注射用氨苄西林钠120mg·kg-1组；⑤注射用复方氨苄西林钠50mg·kg-1组；⑥注射用氨苄西林50mg·kg-1组。麻醉，分离颈总动脉，插管，取血0.5ml后①、②、⑤、⑥组给药，每h取血1次，共5次，③、④组间隔6h连续给药5次，首次给药和末次给药后每h取血1次，共5次。血液3000rpm离心10min，取上清液，置于-20℃冰箱，备用。
2.2 培养基和菌悬液的制备
普通培养基和两种细菌悬液等制备均按照抗生素微生物测定法进行：菌种复壮，钓取菌于琼脂斜面传一代，移种于5ml肉汤培养管种孵育18h，试验前经预试测定加入培养基(每500ml菌悬液培养基中加入大肠杆菌0.5ml；每500ml加入金黄色葡萄球菌5ml)。
2.3 双碟的制备
取平底双碟，注入加热的培养基。另取培养基加热溶化，放冷至48℃～50℃，加入金黄色葡萄球菌和大肠杆菌悬浮液5.5ml，放置水平台上冷却后，在每双碟中均匀安置4个牛津小杯，备用。
2.4 测定抑菌面积
用ZY-300IV多功能微生物自动测量分析仪测定经37℃温箱中培养8～12h后的培养基的抑菌圈，结果见表1～6。
表1显示注射用复方氨苄西林钠300mg·kg-1和注射用氨苄西林钠相比，各个时间点对培养的金黄色葡萄球菌的抑菌作用增强(P<0.05或P<0.01)。
表2显示注射用复方氨苄西林钠120mg·kg-1多次家兔给药与注射用氨苄西林钠120mg·kg-1多次给药相比，药后各个时间点采集的血浆对金黄色葡萄球菌的抑制作用增强(P<0.01)。
表3显示注射用复方氨苄西林钠50mg·kg-1与注射用氨苄西林钠50mg·kg-1相比，各个时间点对培养的金黄色葡萄球菌的抑制作用均有显著性的差异(P<0.05或P<0.01)，复方氨苄西林钠或氨苄西林钠均在采血4h后检测不到对金黄色葡萄球菌的抑制作用。
表4显示与注射用氨苄西林钠300mg·kg-1组相比，注射用复方氨苄西林钠组各个时间点的抑菌圈均高于注射用氨苄西林钠组的抑菌圈(P<0.01)。注射用氨苄西林钠300mg·kg-1组在3h后检测不到其抑菌作用，而注射用复方氨苄西林钠300mg·kg-1组仍可检测到抑菌作用。
表5显示与注射用氨苄西林钠组相比，注射用复方氨苄西林钠120mg·kg-1各个时间点对大肠杆菌的抑制作用均有显著性差异(P<0.01)。
表6显示，注射用复方氨苄西林钠50mg·kg-1与注射用氨苄西林钠均单次家兔给药，后者没有检测到对大肠杆菌抑菌作用。
3 结论与讨论
抗生素浓度越大，抑菌圈面积越大，浓度和抑菌面积正相关。我们设计实验以120mg·kg-1注射用复方氨苄西林钠连续5次给药，间隔6h，末次取血，得血浆，采用管碟法测量，并对比注射用复方氨苄西林钠和注射用氨苄西林钠两个组分别对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌作用，以抑菌圈的面积作监测指标，考察含有氨苄西林钠的血浆对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的作用。复方氨苄西林钠和氨苄西林钠组相比，各个时间点的抑菌作用均有显著性差异(P<0.01)，使得氨苄西林钠抑菌曲线右移；注射用氨苄西林钠120mg·kg-1多次静脉给药与注射用复方氨苄西林钠120mg·kg-1单次静脉给药相比，相同时间点采集的血浆对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌抑菌作用相当(P>0.05)；注射用复方氨苄西林钠120mg·kg-1单次静脉给药与注射用复方氨苄西林钠120mg·kg-1多次静脉给药相比，相同时间点采集的血浆对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌作用有显著性差异(P<0.05或P<0.01)，如末次注射用氨苄西林钠120mg·kg-1和注射用复方氨苄西林钠120mg·kg-1第1h取血浆的抑菌面积从1.5±0.1cm2增大到3.3±0.3cm2，P<0.01。可见注射用氨苄西林钠连续给药在家兔体内蓄积不显著，而注射用复方氨苄西林钠连续给药后蓄积明显。
参考文献：
[1] Kampann J. Effect of probenecid on the excretion of ampi-
cillin in human bile[J]. Br J Pharmacol，1973(47)：782-792.
[2] Whyatt PL . Bioavailability of 17 ampicilllin products [J]. J pharm Sci，1976(65)：652-659.
[3] 孔小东，蔡玉珉.丙磺舒对氨苄青霉素药物动力学影响[J].中国医院药学杂志，1987，7(1)：3-6.
Anti-infection effect of Compound Ampicillin Sodium for Injection in rabbits
He Lize1，2，Wang Peixian1，2
(1.Guangzhou Anjian Industry Development Co. Ltd，Guangdong，510420；
2.Pharmacy college of Xian Jiaotong University ，Xian ，Shannxi，710061)
Abstract：Objective：Test the antibiotics effect of Compound Ampicillin Sodium for Injection in rabbits. Methods：In vito，investigated Compound Ampicillin Sodium for Injection on antibiotics effect of staphylococcus and Escherichia coli after single and multiple dose administration with method of cup-plate method. Results：Compared with Ampicillin Sodium for Injection，Compound Ampicillin Sodium for Injection 300 mg·kg-1、120 mg·kg-1 and 50 mg kg-1 could significantly increase the concentration of ampicillin sodium in plasma of rabbits (p<0.05 or p<0.01) and increase the effect of bactericide action on staphylococcus and Escherichia coli. Conclusion：Compared with Ampicillin Sodium for Injection，Compound Ampicillin Sodium for Injection could increase the anti-infection effect of ampicillin sodium.
Key words：Compound ampicillin sodium；Ampicillin sodium for injection；Anti-infection effect