【摘 要】
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目的:制备聚酰胺胺型树枝状分子(polyamidoamine dendrimer,PAMAM-D)载送CXCR4-shRNA的纳米复合微粒(PAMAM-shRNA),研究其在体外抑制人肾癌A498细胞增殖的效应。方法:将第7代
【机 构】
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武警上海总队医院肾内科; 第二军医大学长海医院特需诊疗科;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(No.81202019);上海市卫生局青年科研资助项目(No.2011Y197)~~
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目的:制备聚酰胺胺型树枝状分子(polyamidoamine dendrimer,PAMAM-D)载送CXCR4-shRNA的纳米复合微粒(PAMAM-shRNA),研究其在体外抑制人肾癌A498细胞增殖的效应。方法:将第7代的PAMAM-D室温下与CXCR4-shRNA混合(质量比为1∶0.73),制备成纳米树形分子与CXCR4-shRNA的纳米复合物PAMAM-shRNA,采用透射电镜观察PAMAMshRNA的形态结构,激光粒径仪测定其粒径。分别以PAMAM-shRNA、CXCR4-shRNA和PAMAM-D转染A498细胞,MTT法检测PAMAM-shRNA对肾癌细胞A498增殖的抑制作用,流式细胞术检测PAMAM-shRNA诱导A498细胞的凋亡情况,Real-time PCR分析转染后肾癌A498细胞CXCR4 mRNA的表达水平。结果:成功制备的新型纳米复合微粒PAMAM-shRNA分散性好,不粘连,其平均粒径为(176.5±25.48)nm。PAMAM-shRNA可以有效地抑制人肾癌细胞A498的增殖,且随着PAMAM-shRNA浓度和药物作用时间的增加,细胞增殖抑制的效果越明显,其最高增殖抑制率达(66.5±2.7)%;其还可加强诱导肾癌A498细胞凋亡。Real-time PCR检测结果表明,与CXCR4-shRNA组相比,PAMAM-shRNA组的CXCR4 mRNA的表达水平明显下降[(0.29±0.035)vs(0.70±0.084),P<0.05]。结论:PAMAM-D能高效递送CXCR4-shRNA进入A498细胞,PAMAM-shRNA以剂量和时间依赖方式显著抑制肾癌细胞增殖和诱导肾癌细胞凋亡,其在肿瘤基因治疗中具有潜在的应用价值。
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