【摘 要】
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目的 研究不同浓度的人羊膜匀浆提取液对兔角膜成纤维细胞增殖及转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1) mRNA表达的影响,探讨人羊膜匀浆提取液抑制角膜瘢
【机 构】
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广东第二中医院眼科, 广东省广州市,510095;暨南大学第二附属医院深圳市人民医院眼科, 广东省深圳市,518020;中南大学湘雅二医院眼科, 湖南省长沙市,410011
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目的 研究不同浓度的人羊膜匀浆提取液对兔角膜成纤维细胞增殖及转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1) mRNA表达的影响,探讨人羊膜匀浆提取液抑制角膜瘢痕增生的机制.方法 采用消化法获得原代兔角膜成纤维细胞并传代培养,应用波形蛋白和角蛋白抗体免疫细胞化学方法对培养的细胞进行鉴定.采用MTT比色法观察不同浓度人羊膜匀浆提取液(0 mg·L-1、40 mg·L-、80 mg·L-1、160 mg·L-1,即对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组)对兔角膜成纤维细胞增殖的影响,同时利用RT-PCR检测不同浓度的人羊膜匀浆提取液对兔角膜成纤维细胞TGF-β1 mRNA表达的影响.结果 体外培养细胞的免疫细胞化学染色显示:波形蛋白抗体染色呈阳性,角蛋白抗体染色呈阴性,证实所培养的细胞为角膜成纤维细胞.与对照组(OD值0.415±0.026)比较,不同浓度人羊膜匀浆提取液组兔角膜成纤维细胞增殖均显著受抑制(OD值分别为0.335±0.013、0.220±0.018、0.094±0.005),差异均有显著统计学意义(均为P ＜0.01).与对照组(1.768±0.040)比较,不同浓度人羊膜匀浆提取液组兔角膜成纤维细胞TGF-β1 mRNA相对表达量(1.519±0.669、0.617±0.014、0.622±0.031)显著降低,差异均有显著统计学意义(均为P＜0.01),但中、高浓度组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 人羊膜匀浆提取液具有抑制体外培养的兔角膜成纤维细胞增殖作用,并随着羊膜匀浆提取液浓度的增加,其抑制作用增强.
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