【摘 要】
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研究旨在利用DNA印迹法测量端粒长度从而预测植物的年龄,但木本植物体内富含黄酮类、酚类、多糖、萜类等次生代谢物质,严重影响了提取的基因组DNA产量和质量,以及后续的酶切
【机 构】
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北京林业大学生物科学与技术学院/林木育种国家工程实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目“沙冬青脱水素基因家族适应性进化研究”(31270737), 高等学校学科创新引智计划项目“林木发育及逆境适应性的分子机制”(B13007), 长江学者和创新团队发展计划项目“林木发育遗传调控与抗逆分子机制的研究”(IRT13047), 北京市自然科学基金项目“常绿抗逆灌木沙冬青Am CIP基因功能研究”(6112016).
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研究旨在利用DNA印迹法测量端粒长度从而预测植物的年龄,但木本植物体内富含黄酮类、酚类、多糖、萜类等次生代谢物质,严重影响了提取的基因组DNA产量和质量,以及后续的酶切及杂交实验结果。笔者以北京颐和园5种古树为实验材料,在传统CTAB法提取DNA基础上,不同树种分别添加2%-6%PVP,可有效去除次生代谢物质对DNA的干扰,可被限制性内切酶HinfⅠ酶切完全。同时,对DNA印迹法的其他实验参数如DNA量、曝光时间进行了优化,并进行了3种不同年龄古树端粒长度测定,结果显示古树的平均端粒长度要高于幼树,本研究
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