探讨不同浓度固有防御调节肽(IDR-1018)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)成熟生物被膜的破坏作用以及对MRSA生物被膜形成的抑制作用。
方法将MRSA以1×105 CFU/ml均匀接种于96孔板,48 h后建成生物被膜模型。给予用胰酪胨大豆肉汤培养基(TSB)倍比稀释的不同浓度的IDR-1018溶液作为实验组,使其加入细菌悬液后的浓度达到3.75~1 000 mg/L。红霉素倍比稀释制成不同浓度梯度的药液后,与低浓度(15 mg/L)IDR-1018联合作为混合组。等量TSB作为空白对照组。24 h时结晶紫染色半定量法,测吸光度(A)值,检测生物被膜的生长情况。采用SPSS 18.0统计软件对数据进行统计分析。
结果与对照组(A595=1.764±0.026)相比较,IDR-1018对成熟的MRSA生物被膜发挥了较为显著的破坏作用,且IDR-1018对生物被膜的影响存在一定的剂量依赖关系,即随着药物浓度的不断降低,其对生物被膜的破坏作用出现了一定幅度的下降。当浓度低至15 mg/L时,A595=0.946±0.047(t=32.955,P<0.01);浓度为7.5 mg/L时,A595=1.211±0.054(t=12.731,P<0.05);浓度为3.75 mg/L时,A595=1.360±0.066(t=4.843,P<0.05),与对照组相比差异仍具有统计学意义。对于尚未成熟的生物被膜,与对照组(A595=1.689±0.068)比较,当浓度低至15 mg/L(A595=0.846±0.057,t=34.127,P<0.01)时,IDR-1018对MRSA生物被膜的形成过程仍具有较为显著的抑制作用;而浓度降至7.5 mg/L(A595=1.402±0.181,t=5.240,P<0.05)时,对生物被膜的抑制作用出现了一定幅度的下降,但与对照组比较差异仍具有统计学意义。浓度为3.75 mg/L(A595=1.631±0.190,t=0.913,P>0.05)时,这种抑制作用出现了较明显的下降。当低浓度(15 mg/L)的IDR-1018和不同浓度的红霉素联合使用时,其对MRSA生物被膜的破坏与抑制作用明显高于单独使用红霉素,亦优于单独使用IDR-1018时的效果。
结论在MRSA生物被膜生成过程中,IDR-1018可以起到较好地抑制作用;对于已经成熟的MRSA生物被膜,IDR-1018可以起到较好地破坏作用。