论文部分内容阅读
目的
探讨阿仑膦酸钠联合骨化三醇对成骨细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, AKP)活性、细胞增殖及OPG/RANKL蛋白表达的影响。
方法以骨髓间充质干细胞诱导分化成骨细胞,获得成骨细胞后分别加入不同浓度阿仑膦酸钠(1×10-10、1×10-9、1×10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4mmol/L)与骨化三醇(1×10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4、1×10-3、1×10-2mmol/L),测定成骨细胞AKP活性及观察茜素红染色情况,继而确定最佳单药浓度。比较两种单药及联合用药(均选择最佳单药浓度)对成骨细胞AKP活性、细胞增殖及OPG/RANKL蛋白表达的影响。多组间AKP活性的比较采用方差分析,进一两组间的比较采用q检验,率的比较采用χ2检验。
结果成骨细胞诱导分化成功。阿仑膦酸钠与骨化三醇的最佳单药浓度分别为1×10-6mmol/L、1×10-4mmol/L。相对于无药物处理的成骨细胞组,各药物处理组差异明显,其中阿仑膦酸钠+骨化三醇的联合用药组成骨细胞AKP活性最强、钙结节形成最多、细胞增殖最明显,其次为骨化三醇单药组,再次为阿仑膦酸钠组;另外,单纯成骨细胞诱导组及联合用药组的OPG蛋白表达均明显升高、RANKL蛋白表达明显降低,而且联合用药组较单纯成骨细胞诱导组OPG蛋白的升高水平更显著、RANKL蛋白的下降水平更显著。
结论阿仑膦酸钠联合骨化三醇具有显著的调节成骨细胞AKP活性、钙结节形成、细胞增殖及OPG/RANKL蛋白表达的作用。