粉尘螨Der f15的基因克隆与其表达载体的构建

来源 :江西师范大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：acmevb

【摘要】

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先挑取纯培养的粉尘螨,提取总的RNA,后采用RT-PCR方法进行反转录出cDNA.由cDNA提取出目的基因进行片段扩增,产物连接入T载体（pMD18-T）.经扩增后,用EcoR I和Xho I双酶切,将目的

【作者】

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李钟鸣邬玉兰刘志刚

【机构】

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深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所

【出处】

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江西师范大学学报：自然科学版

【发表日期】

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2013年2期

【关键词】

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粉尘螨 Der f15 克隆载体构建 dermatophagoides farina Der f15 cloning vectorconstructi

【基金项目】

：

国家“863”计划（2006AA02A231）, 国家自然科学基金（81071388）, 广东省自然科学基金（04554）, 广东省高等学校国际暨港澳台科技合作创新平台项目（2012gjhz0009）, 深圳市重点实验室组建项目（SW201110010）, 深圳市科技计划基础研究重点项目（JCYJ20120613100657482）, 深圳市南山区一般研发课题（KC2012JSYB0003A）资助

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先挑取纯培养的粉尘螨,提取总的RNA,后采用RT-PCR方法进行反转录出cDNA.由cDNA提取出目的基因进行片段扩增,产物连接入T载体（pMD18-T）.经扩增后,用EcoR I和Xho I双酶切,将目的基因分别连接到pET28和pET32的表达载体上,得到重组质粒pET28和pET32,即粉尘螨的基因克隆与表达载体构建成功.

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