【摘 要】
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目的本研究对TNF家族B细胞激活因子(B cell activating factor to the TNF family,BAFF)的胞外区134~285位氨基酸残基进行克隆,构建原核表达载体pET21a-s BAFF,并进行表达及
【机 构】
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南京大学生命科学学院/江苏省产业技术研究院医药生物技术研究所/南京市医药生物技术创业创新中心
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(2012AA020304),江苏省科技支撑计划-社会发展项目(BE2013630)
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目的本研究对TNF家族B细胞激活因子(B cell activating factor to the TNF family,BAFF)的胞外区134~285位氨基酸残基进行克隆,构建原核表达载体pET21a-s BAFF,并进行表达及纯化。方法以K562细胞系的cDNA为模板,采用PCR扩增s BAFF基因,构建pET21a-s BAFF。在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达sBAFF,超声碎菌,提取包涵体,经Ni2+-IDA亲和层析纯化,复性,采用SDS-PAGE鉴定纯化产物。结果通过优化确
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