鉴别牛早期胚胎性别PCR方法引物的设计与筛选

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根据牛Y-染色体特异重复序列、睾丸特异蛋白基因以及性别决定基因序列设计合成5对公牛Y-染色体特异引物, 依据牛骨胳肌α肌动蛋白前体基因和微卫星DNA 序列设计合成4对牛DNA特异引物(内标引物).单重PCR扩增牛基因组DNA,筛选出4对牛Y-染色体特异引物和1对牛DNA特异内标引物.将不同的Y-染色体特异引物与内标引物组合,多重PCR扩增牛基因组DNA、已知性别的牛成纤维细胞和克隆胚胎,筛选出2个可用于牛早期胚胎性别鉴别的PCR引物组合: B34/A12 和B78/A12.
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