长链非编码RNA TTN-AS1靶向miR-134-5p调控乳腺癌细胞的生长和转移

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目的探讨长链非编码RNA(LncRNA) TTN-AS1对乳腺癌生长和转移的作用及机制。方法 qRT-PCR检测TTN-AS1在MDA-MB-231、BT-20、SKBR-3、MCF-7、MDA-MB-468 5种乳腺癌细胞中的表达水平。乳腺癌细胞转染shRNA抑制TTN-AS1的表达,转染后,CCK8检测各组细胞的增殖能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡水平,Transwell小室法检测各组细胞迁移能力,Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved-Caspase-3、Caspase-3相对表达水平。miRcode数据库预测LncRNA TTN-AS1与miR-134-5p的结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA TTN-AS1与miR-134-5p的靶向关系。乳腺癌细胞中转染shRNA抑制TTN-AS1的表达的同时转染miR-134-5p inhibitor抑制miR-134-5p的表达,然后检测细胞增殖、凋亡、迁移能力及凋亡相关蛋白的表达。结果 TTN-AS1在5种乳腺癌细胞中均高表达;抑制TTN-AS1的表达后乳腺癌细胞的增殖和迁移能力显著下调,细胞凋亡水平显著增加,Bcl-2表达显著下调,Bax、Cleaved-Caspase-3显著上调(均P<0.05)。miR-134-5p为LncRNA TTN-AS1靶基因,抑制TTN-AS1表达的同时抑制miR-134-5p表达细胞增殖和迁移能力均显著高于单独抑制TTN-AS1组,细胞凋亡水平显著低于单独抑制TTN-AS1组,凋亡相关蛋白表达亦呈显著变化(均P<0.05)。结论 TTN-AS1通过靶向抑制miR-134-5p调控乳腺癌细胞的增殖、凋亡、迁移能力以及凋亡相关蛋白的表达。
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