【摘 要】
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目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)诱导的人胚肺成纤维细胞(HFL-I)转分化中磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路的活动状态以及相关性的研
【基金项目】
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宁波市自然科学基金资助项目(2008A610081)
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目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)诱导的人胚肺成纤维细胞(HFL-I)转分化中磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路的活动状态以及相关性的研究。方法将体外培养的HFL-I分成4组:(1)CTGF处理组(20 ng/ml);(2)LY294002(10 mol/L)预处理60min,再行CTGF刺激(20 ng/ml);(3)SB203580(10 mol/L)预处理60 min,再行CTGF刺激(20 ng/ml);(4)LY294002(10 mol/L)和SB203580(10 mol/L)联合作用60 min,再加入CTGF(20 ng/ml)。选取不同时相点,Western blot测定平滑肌肌动蛋白(-smooth muscle actin,-SMA)、p-Akt和Akt的蛋白表达;RT-PCR检测PI3K和p38MAPKmRNA表达。结果与对照组相比,CTGF诱导15 min后p-Akt水平升高,30 min时达至顶峰(<0.01)。CTGF诱导24h后-SMA表达显著升高(<0.01),可被LY294002阻断。LY294002和SB203580单独或联合预处理后,显著抑制CTGF诱导的p-Akt活化(<0.01)。结论 CTGF诱导的成纤维细胞-肌成纤维细胞转分化中有PI3K/Akt通路的激活,PI3K和p38MAPK均可以调节Akt的活性,其特异性抑制剂均可阻断Akt的磷酸化。
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