【摘 要】
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目的 研究微重力对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨细胞(OB)分化的影响.方法 小鼠股骨离断法提取BMSCs,传代扩增.取第4代BMSCs分为4组:①正常重力组(NG组),正常重力条件下无成
【机 构】
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300161天津,军事医学科学院卫生装备研究所300162 天津,武警后勤学院附属医院脊柱一科;武警后勤学院附属医院脊柱一科, 天津,300162;军事医学科学院卫生装备研究所,天津,300161;
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目的 研究微重力对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨细胞(OB)分化的影响.方法 小鼠股骨离断法提取BMSCs,传代扩增.取第4代BMSCs分为4组:①正常重力组(NG组),正常重力条件下无成骨诱导.②微重力组(MG组),微重力条件下无成骨诱导.③正常重力诱导组(NG+Ⅰ组),正常重力条件下行成骨诱导.④微重力诱导组(MG+Ⅰ组),微重力条件下行成骨诱导,培养10d.噻唑蓝(MTT)法测定各组BMSCs的增殖;茜素红染色检测细胞基质钙沉积;细胞碱性磷酸酶(ALP)活性测定以计算其在细胞基质中的表达;实时定量PCR(qPCR)及Western Blot检测相关基因及蛋白表达.结果 MG组细胞培养4d后数量开始多于NG组(P＜0.05);茜素红染色示BMSCs诱导10d,NG+Ⅰ组出现较多的矿化结节,而MG组基本无矿化结节,NG组和MG+Ⅰ组出现的结节均较少;qPCR结果示NG组和MG组中COL Ⅰ、ALP、RUNX-2基因的相对值分别为2.41±0.30 vs 0.56±0.19、2.15±0.12 vs 0.16±0.15、0.98±0.12 vs 0.16±0.05,差异均有统计学意义(P＜0.05);MG+Ⅰ组上述3种基因相对值也均低于NG+Ⅰ组:1.79±0.10 vs 0.59±0.04、1.57±0.19 vs 0.57±0.08、1.30±0.14 vs 0.74±0.05,差异均有统计学意义(P＜0.05);Western Blot检测结果与qPCR基本一致,即微重力条件能明显抑制成骨相关蛋白的表达.结论 微重力条件可促进BMSCs增殖,抑制BMSCs向成骨细胞的分化.
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