【摘 要】
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目的探索应用酵母双杂交系统筛选造血因子受体胞内区结合蛋白的可行性.方法利用RT-PCR从小鼠NFS-60和BET-2细胞中扩增G-CSF受体和EPO受体胞内区全长序列,并连接至酵母表达载
【机 构】
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四川农业大学玉米研究所,军事医学科学院放射医学研究所
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目的探索应用酵母双杂交系统筛选造血因子受体胞内区结合蛋白的可行性.方法利用RT-PCR从小鼠NFS-60和BET-2细胞中扩增G-CSF受体和EPO受体胞内区全长序列,并连接至酵母表达载体pGBKT7,转化酵母菌株AH109,提取蛋白进行Western blotting分析,进一步用β-半乳糖苷酶方法检测蛋白转录激活活性.结果Westem blotting结果显示,G-CSF受体和EPO受体在酵母细胞中均可以正常表达.β-半乳糖苷酶检测结果发现,G-CSF受体在酵母细胞中不呈现转录激活功能,然而EPO受体
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