【摘 要】
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目的探讨低毫安电化学疗法(ECT)对人乳腺癌耐药株MCF-7/阿霉素(ADR)细胞诱导凋亡及逆转多药耐药(MDR)的作用机制。方法电化学处理细胞后继续培养6 h和24 h,用噻唑蓝(MTT)法、膜联蛋白V(Annexin V)染色、激光共聚焦显微镜观察ECT对肿瘤细胞的生长抑制、凋亡变化;荧光分光光度法检测细胞内ADR的浓度;实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法、Western b
【机 构】
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750002银川,宁夏自治区人民医院总院微创乳腺外科,宁夏医科大学,宁夏医科大学,宁夏医科大学,宁夏医科大学,750002银川,宁夏自治区人民医院总院微创乳腺外科,750002银川,宁夏自治区人民医院
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目的探讨低毫安电化学疗法(ECT)对人乳腺癌耐药株MCF-7/阿霉素(ADR)细胞诱导凋亡及逆转多药耐药(MDR)的作用机制。
方法电化学处理细胞后继续培养6 h和24 h,用噻唑蓝(MTT)法、膜联蛋白V(Annexin V)染色、激光共聚焦显微镜观察ECT对肿瘤细胞的生长抑制、凋亡变化;荧光分光光度法检测细胞内ADR的浓度;实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法、Western blot法检测多药耐药基因(MDR1)、第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3基因mRNA和蛋白表达。
结果ECT能明显抑制MCF-7/ADR细胞的生长,实验组凋亡率比对照组明显增加(P< 0.05);5 C ECT作用后,细胞内的ADR积累增加了4.61倍,实验组PTEN、Caspase-3的相对表达量及蛋白表达随电量的增加明显增高;5 C时P-糖蛋白(P-gp)的相对表达量为0.293± 0.013、p-Akt蛋白的相对表达量为0.397±0.020,与空白对照组比较,表达明显下降(P< 0.01)。
结论ECT可抑制MCF-7/ADR细胞生长,诱导凋亡,具有逆转多药耐药性,其机制可能主要与ECT作用Akt基因抑制磷脂酰肌醇3-激酶/(PI3K)/Akt信号通路等参与的凋亡途径相关。
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