急性视网膜缺血缺氧性损伤在眼科较为常见，如青光眼急性发作、视网膜中央动脉阻塞、缺血性视神经病变等，可引起视网膜的缺血缺氧损伤，并可致视网膜神经节细胞(RGCs)的死亡。内源性大麻素(CB)及其受体(CBR)参与中枢神经系统外伤、缺血、炎症及中毒等多种生理病理过程。

探讨视网膜神经节细胞(RGCs)在缺氧缺糖损伤中内源性CB的作用及意义。

取6周龄正常C57BL/6J小鼠眼球，制备小鼠视网膜垂直冰冻切片，采用免疫荧光染色法检测和验证CB1R和CB2R在RGCs中的表达。10只C57BL/6J新生鼠浸入75%乙醇消毒后取眼球，在冰上预冷的DMEM培养基中分离视网膜进行RGCs原代培养，采用免疫荧光技术检测培养细胞中RGCs标志物Brn3a的阳性表达并确定培养细胞中CB1R和CB2R的表达。将原代培养14 d的RGCs分为正常对照组和氧糖剥夺(OGD)组，分别用完整培养基＋体积分数95%空气＋体积分数5%CO₂和无糖培养基＋体积分数95%N₂＋4%CO₂＋体积分数1%O₂条件下培养20 h。采用JC-1染色法检测细胞中线粒体结构变化和RGCs的形态变化。各组细胞分别给予1 μmol/L CB1R拮抗剂SR141716A、1 μmol/L CB2R拮抗剂SR144528以及5 μmol/L、10 μmol/L CB1R和CB2R激活剂WIN 55212-2，采用MTT法比较各组RGCs存活率。

正常C57BL/6J小鼠视网膜全层均可见CBR的表达。正常对照组培养的RGCs大小均匀，多呈多角形，细胞间轴突细长并形成网络，细胞中Brn-3a表达阳性；OGD组培养的细胞皱缩或形成碎片，多数细胞轴突消失，Brn-3a表达荧光强度明显减弱。正常对照组RGCs中JC-1染色显示，线粒体的黄色荧光明显强于OGD组，表明OGD组线粒体膜电位明显下降。MTT法检测显示，正常对照组RGCs存活率为(100.00±13.87)%，明显高于OGD组的(89.52±18.16)%，差异均有统计学意义(q＝8.065，P＝0.008)；SR141716A和SR144528作用后OGD组细胞存活率分别为(116.63±22.21)%和(112.61±19.02)%均明显高于同组的无药物处理细胞的存活率(89.52±18.16)%，差异均有统计学意义(q＝29.780、17.391，均P<0.01)，而SR141716A和SR144528作用后正常对照组细胞存活率的变化差异均无统计学意义(均P>0.05)。

细胞缺氧缺糖时上调CB在细胞中的表达和激活CB活性。在缺氧缺糖条件下，抑制细胞中CBR的激活过程对RGCs有保护作用。