【摘 要】
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目的筛选含抑龋相关基因/DNA片段的阳性克隆,为探究变形链球菌高、低毒力株致龋能力的差异奠定基础.方法将抑制消减杂交方法获得的低毒力株特异的消减PCR产物与T/A载体pCR2.1
【机 构】
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北京大学口腔医学院生物教研室,第四军医大学口腔医学院牙体科,卫生部北京医院核医学科
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目的筛选含抑龋相关基因/DNA片段的阳性克隆,为探究变形链球菌高、低毒力株致龋能力的差异奠定基础.方法将抑制消减杂交方法获得的低毒力株特异的消减PCR产物与T/A载体pCR2.1连接,将连接产物转化E.coli TOP10F'感受态细胞,进行蓝白筛选.对96个转化子进行Clony PCR,将PCR产物点样于同一尼龙膜上,分别与地高辛标记的变形链球菌高、低毒力株基因组DNA-AluI酶切产物杂交,高通量筛选阳性克隆.结果随机挑取了96个白色或白色中央有蓝色的菌落,经过Clony PCR,其中有4个转
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