【摘 要】
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目的:探索CPEB4在K562细胞中的表达、生物学活性及其可能的分子机制.方法:采用Western blot检测正常白细胞和K562细胞中CPEB4的表达情况;再将过表达质粒pcDNA3.1(+)-His-CPEB
【机 构】
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山西医科大学汾阳学院科技中心,山西汾阳,032200山西省人民医院肾脏病分子诊断与治疗实验室,山西太原,030000;
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目的:探索CPEB4在K562细胞中的表达、生物学活性及其可能的分子机制.方法:采用Western blot检测正常白细胞和K562细胞中CPEB4的表达情况;再将过表达质粒pcDNA3.1(+)-His-CPEB4、沉默质粒pPLK+Puro-CPEB4 shRNA电穿孔转染K562细胞,改变CPEB4在K562细胞中的表达量,应用Western blot检测转染效率;最后应用CCK-8和流式细胞术检测不同处理的细胞增殖和凋亡情况,并用Western blot法检测增殖与凋亡标志蛋白(AKT、p-AKT、caspase-3、BCL-2)的表达变化.结果:与正常白细胞相比,K562细胞中CPEB4蛋白表达量较高(P＜0.01);CPEB4沉默的K562细胞与对照组相比,细胞增殖水平显著增高(P＜ 0.001),细胞凋亡数显著减少,AKT、p-AKT、BCL-2蛋白表达水平明显增高,而caspase-3蛋白表达显著降低;CPEB4过表达后的K562细胞增殖减慢(P＜0.05),细胞凋亡数明显增加,AKT、p-AKT和BCL-2蛋白表达显著降低,caspase-3蛋白表达增高.结论:CPEB4可抑制K562细胞增殖,促进K562细胞凋亡,而AKT、p-AKT、BCL-2和Caspase-3等分子参与调控机制.
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