缺氧对口腔扁平苔藓角质形成细胞增殖及缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶9表达的影响

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目的

探讨缺氧对人口腔扁平苔藓(oral lichen planus, OLP)角质形成细胞增殖及缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)及基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9, MMP-9)表达的影响,以期为OLP发病机制的研究提供新思路。

方法

体外分离培养OLP角质形成细胞;使用密闭培养箱模拟缺氧环境,分为常氧组和缺氧组,两组细胞分别培养12、24、36及48 h,采用细胞计数试剂盒8的方法监测缺氧各时点细胞增殖状况,并确定进一步实验干预时间点,每组实验均重复3次;SYBR Green I荧光染料实时定量PCR法和蛋白质印迹法分别检测各组细胞HIF-1α、VEGF、MMP-9 mRNA和蛋白表达水平,并采用相关性分析研究VEGF、MMP-9与HIF-1α的相关性。

结果

24、36、48 h缺氧组OLP角质形成细胞增殖力(A值)(分别为0.340±0.002、0.415±0.006、0.546±0.006)均显著低于同时间点常氧组(分别为0.431±0.001、0.620±0.004、1.022±0.005),P<0.01;24、36、48 h缺氧组VEGF(2.087±0.291、3.189±0.573、5.402±0.563)及MMP-9(2.936±0.500、4.083±0.300、6.374±0.858)的mRNA表达量均显著高于常氧组(P<0.05),HIF-1α(0.414±0.093、0.751±0.056、0.875±0.040)、VEGF(0.393±0.046、0.557±0.078、0.767±0.045)及MMP-9(0.250±0.053、0.384±0.038、0.611±0.092)的蛋白表达量均显著高于常氧组(P< 0.05)。HIF-1α与VEGF(r=0.905,P=0.000)及MMP-9(r=0.881,P=0.000)的蛋白表达水平均呈显著正相关。

结论

缺氧在一定时间内可抑制OLP角质形成细胞增殖,上调细胞中HIF-1α蛋白、VEGF及MMP-9 mRNA和蛋白的表达;缺氧环境下HIF-1α可能通过调控下游靶基因参与OLP的病情进展。

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