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将含有ILTVgD糖蛋白基因的重组质粒pMD-T-gD用EeoRⅠ和HindⅢ双酶切后，回收目的片段，将其连接到原核表达载体pET-28a（＋）中，构建重组表达质粒pET-gD。将pET-gD转化到宿主表达菌BL21中，用IPTG诱导表达，SDS-PAGE结果显示表达目的蛋白大小为55000，Western blotting表明表达产物具有良好的免疫原性。表达的蛋白产物经纯化后作为ELISA包被抗原，以辣根过氧化物酶标记的羊抗鸡IgG作为二抗，初步建立了间接ELISA诊断方法，并确定了抗原最佳包被浓度为2