目的 研究胆道闭锁外周血及肝门淋巴结中T淋巴细胞ITGAL基因的表达,并分析其启动子区甲基化情况及对基因表达的影响.方法 收集7例胆道闭锁(胆道闭锁组)及7例非肝脏病变(对照组)患儿外周血2 ml,CD2磁珠分离T淋巴细胞,以BSP法对ITGAL基因启动子区甲基化状态进行检测,Real-time PCR法对ITGAL基因mRNA表达情况进行检测;同时收集7例胆道闭锁及10例胆总管囊肿患儿肝门淋巴结,CD2磁珠分离T淋巴细胞,以BSP法和Real-time PCR法分别对ITGAL基因启动子区甲基化状态及mRNA表达情况进行检测.5-azaC处理Jurkat细胞分析ITGAL基因启动子区低甲基化对该基因表达的影响.结果 ITGAL基因-250 bp到250 bp在各组外周血T细胞和肝门淋巴结T细胞中均处于持续的非甲基化状态,甲基化率均为0%(P＞0.05).胆道闭锁组外周血T淋巴细胞与对照组相比ITGAL基因启动子区-1450 bp到-950 bp甲基化率分别为60.2%和54.4%(P=0.196),而ITGAL基因mRNA表达差异亦无统计学意义(P=0.0735).胆道闭锁肝门淋巴结与胆总管囊肿肝门淋巴结T淋巴细胞ITGAL基因启动子区-1450 bp到-950 bp甲基化率分别为43.6%和65.6%(P=0.000),且ITGAL基因mRNA表达明显升高(P=0.0234).5-azaC处理后Jurkat细胞ITGAL启动子区甲基化程度分别为0.46±0.08和0.21±0.04(P=0.038),处理后ITGAL基因mRNA表达较之前升高2.3倍.结论 胆道闭锁肝门淋巴结中T淋巴细胞存在ITGAI基因启动子区低甲基化改变,同时ITGAL基因高表达,提示甲基化异常是胆道闭锁中T淋巴细胞功能异常的潜在原因。
胆道闭锁中ITGAL基因启动子区甲基化状态改变及其意义
【摘 要】
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目的 研究胆道闭锁外周血及肝门淋巴结中T淋巴细胞ITGAL基因的表达,并分析其启动子区甲基化情况及对基因表达的影响.方法 收集7例胆道闭锁(胆道闭锁组)及7例非肝脏病变(对照组)患儿外周血2 ml,CD2磁珠分离T淋巴细胞,以BSP法对ITGAL基因启动子区甲基化状态进行检测,Real-time PCR法对ITGAL基因mRNA表达情况进行检测;同时收集7例胆道闭锁及10例胆总管囊肿患儿肝门淋巴结
【机 构】
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201102,上海,复旦大学附属儿科医院外科,201102,上海,复旦大学附属儿科医院外科,201102,上海,复旦大学附属儿科医院外科
【出 处】
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中华小儿外科杂志
【发表日期】
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2011年32期
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