神经酰胺介导粒细胞凋亡机理初探

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaoyun1986
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目的:观察神经酰胺对HL60及中性粒细胞(PMN)凋亡产生的影响,探讨其在粒细胞发生过程中可能的调节作用。方法:采用DNA凝胶电泳,流式细胞术,光镜及RTPCR等技术对细胞进行凋亡鉴定及相关基因bcl2,cmycmRNA表达分析。结果:神经酰胺(C2ceramide),肿瘤坏死因子(TNFα)及长春新碱(Vincristine)均可不同程度地诱导HL60及成熟PMN产生凋亡,CPK激活剂PMA,Diacylglycerol无诱凋作用,并对TNFα,C2ceramide及Vincristine诱导的凋亡有不同程度的抑制;上述药物刺激后bcl2,cmycmRNA表达在HL60细胞中呈明显下调趋势,cmycmRNA表达在PMN中也呈轻度下调。结论:神经酰胺可作为HL60、PMN胞内介质参与凋亡信号的传导,且与CPK途径及bcl2,cmyc基因表达相关。 OBJECTIVE: To observe the effect of ceramide on the apoptosis of HL60 and neutrophil (PMN), and to explore the possible regulation of ceramide in granulocyte development. Methods: DNA gel electrophoresis, flow cytometry, light microscopy and RT  PCR techniques such as cell apoptosis identification and related genes bcl  2, c  mycmRNA expression analysis. Results: C2ceramide, TNFα and Vincristine all induced apoptosis in HL60 and mature PMN to some extent, while PMA and Diacylglycerol did not induce apoptosis. And the apoptosis induced by TNFα, C2ceramide and Vincristine were inhibited to varying degrees; the expression of bcl2 and cmycmRNA in HL60 cells was significantly downregulated after the above drug stimulation, and cmycmRNA was also expressed in PMN Showed a slight decrease. Conclusion: Ceramide can be used as HL60, PMN intracellular mediators involved in the signal transduction of apoptosis, and CPK pathway and bcl  2, c  myc gene expression.
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