人Cu,Zn—SOD在酵母系统中的表达

来源 :华东理工大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jiaofangjunonline

【摘要】

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甲醇酵母（Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ）是一种理想的真核蛋白高水平表达系统。将人Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ基因克隆到酵母整合型质粒载体ｐＰＩＣ３．５Ｋ，经转化ｈｉｓ４缺陷型酵母ＧＳ１１５，用ＭＤ培养基及ＰＣＲ方法筛选阳性转化子，并用含Ｇ４１８的ＹＰＤ培养基筛选多拷贝转化子，经甲醇诱

【作者】

：

施惠娟陈哲宇

【机构】

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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物化学研究所,华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物化

【出处】

：

华东理工大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2000年6期

【关键词】

：

人Cu Zn-SOD 甲醇酵母基因表达蛋白质印迹 human copper zincsuperoxide dismutase Pichia pastor

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甲醇酵母（Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ）是一种理想的真核蛋白高水平表达系统。将人Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ基因克隆到酵母整合型质粒载体ｐＰＩＣ３．５Ｋ，经转化ｈｉｓ４缺陷型酵母ＧＳ１１５，用ＭＤ培养基及ＰＣＲ方法筛选阳性转化子，并用含Ｇ４１８的ＹＰＤ培养基筛选多拷贝转化子，经甲醇诱导表达，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和蛋白质印迹杂交结果证实了表达产物为重组的人Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ，经计算机扫描分析，表达量占酵母可溶性

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