【摘 要】
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为快速高效地检测新型鹅细小病毒（Novel goose parvovirus,NGPV），试验根据NGPV VP3基因序列设计特异性引物及探针，以NGPV KC3S3株提取的DNA为模板，在构建质粒标准品的基础上，建立TaqMan探针荧光定量PCR检测方法。结果显示：该方法的标准曲线为y=-3.081 6x+35.389，相关系数（R2）为0.998 1，质粒标准品浓度为1.0×102～1.0×1
【基金项目】
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国家现代农业产业技术体系项目（CARS-42-19）；
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为快速高效地检测新型鹅细小病毒（Novel goose parvovirus,NGPV），试验根据NGPV VP3基因序列设计特异性引物及探针，以NGPV KC3S3株提取的DNA为模板，在构建质粒标准品的基础上，建立TaqMan探针荧光定量PCR检测方法。结果显示：该方法的标准曲线为y=-3.081 6x+35.389，相关系数（R2）为0.998 1，质粒标准品浓度为1.0×102～1.0×108 copies/μL时具有良好的线性关系；该方法对禽流感病毒（Avian influenza virus,AIV）、星状病毒（Astrovirus,AstV）、小鹅瘟病毒（Goose parvovirus,GPV）、番鸭细小病毒（Muscovy duck parvovirus,MDPV）、新型鸭呼肠孤病毒（Novel duck reovirus,NDRV）、禽腺病毒（Fowl adenovirus,FAV）等鸭常见病毒性病原均无特异性扩增；所设计引物及探针的基因序列与GPV及MDPV的相同区域有4～11个碱基发生突变，可以避免GPV及MDPV对检测结果的影响；该方法批内和批间检测变异系数（CV）均小于1.5%，对66份疑似感染NGPV鸭的肝脏样品检测阳性率为59.1%，高于常规PCR检测结果（31.8%）。结果表明，研究所建立的TaqMan探针荧光定量PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性，可以有效区分GPV与MDPV，在NGPV感染的临床诊断和早期防控方面具有良好的应用前景。
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