【摘 要】
：
【目的】探究副鸡禽杆菌（Avibacterium paragallinarum）外膜蛋白lpxM的免疫原性，为预防鸡传染性鼻炎提供理论参考。【方法】构建pET-28a-lpxM原核表达载体，经PCR扩增和双酶切鉴定后将阳性质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，用IPTG进行诱导表达，并对诱导时间和诱导浓度进行优化，用尿素缓冲液纯化重组蛋白lpxM并进行SDS-PAGE分析。利用Wester
【基金项目】
：
北京市自然科学基金（6212009）；
论文部分内容阅读
【目的】探究副鸡禽杆菌（Avibacterium paragallinarum）外膜蛋白lpxM的免疫原性，为预防鸡传染性鼻炎提供理论参考。【方法】构建pET-28a-lpxM原核表达载体，经PCR扩增和双酶切鉴定后将阳性质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，用IPTG进行诱导表达，并对诱导时间和诱导浓度进行优化，用尿素缓冲液纯化重组蛋白lpxM并进行SDS-PAGE分析。利用Western blotting鉴定重组蛋白的特异性。将重组蛋白与MONTANIDEISA 71 VG佐剂制备成疫苗v-lpxM,通过动物试验观察重组蛋白的免疫效果。【结果】重组质粒pET-28a-lpxM转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，经IPTG诱导后成功表达，在37 ku处有目的蛋白特异性条带，在37℃、700 mmol/L IPTG、诱导4 h时蛋白表达量最高；重组蛋白lpxM在上清和沉淀中均有表达，且在沉淀中表达量相对较高；Western blotting结果显示，C型副鸡禽杆菌Modesto株的阳性鸡血清与纯化后的重组蛋白可发生免疫反应。免疫保护试验结果显示，v-lpxM疫苗对A、B和C型副鸡禽杆菌的保护率分别为0、20%和60%。【结论】本研究成功构建了原核表达载体pET-28a-lpxM,实现了lpxM重组蛋白的高效表达，且表现出良好的免疫原性。研究结果为探究副鸡禽杆菌外膜蛋白lpxM的免疫学特性以及为鸡传染性鼻炎的预防和疫苗的研发奠定了基础。
其他文献
对党忠诚是党的政治建设的根本和核心，一个重要原因是因为对党忠诚本身蕴涵着马克思主义哲学的因子。从历史哲学基础看，习近平坚持马克思主义唯物史观，不断深化对共产党执政规律、社会主义建设规律和人类社会发展规律的认识和运用，对党忠诚保证全党站在历史正确一边并掌握历史主动。从实践哲学基础看，习近平坚持马克思主义实践观，强调“知行合一”,而对党忠诚也要求发于内而形于外，并最终在实践中接受检验。从价值哲学基础看
目的探究呼吸道感染患儿痰液标本细菌培养、病原菌分离及耐药性。方法选取我院2017年11月至2019年11月我院呼吸道感染患儿482例为研究对象,分别行痰液标本细菌培养并分离致病菌株,以药敏试验分析其耐药性。结果 482例患儿共分离病原菌517株,其中革兰阴性菌307株,占59.38%;革兰阳性菌131株,占25.34%;真菌79株,占15.28%;革兰阴性菌对头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、
核电厂群堆管理模式已成为我国发展核电的主要趋势，由于群堆模式下堆型复杂、机组数量多、运行状态不同等因素，电厂的采购工作存在采购量大、物资种类复杂、市场供应条件差异大等难点，加之新时代下更加多元的市场环境，如何规范、高效、专业地开展群堆模式下的物资服务保障工作，将是今后采购工作的重点。采购管理的精细化是新形势下采购工作的主要目标，通过采购分工模式作为出发点，以秦山核电为研究对象，探索多机组、多堆型的
2023年2月《深圳市“工业上楼”项目审批实施方案》的印发将开启新一轮的产业发展契机。过去10年，深圳市工业厂房改造以“工改工”模式为主，未来，“工业上楼”模式会成为深圳市工业区改造的主要方向。鉴于此，本文从财会角度分析工业上楼项目开发运营企业的主要风险，包括投资风险、成本管控风险、回迁风险、企业运营风险等，并提出风险对策，包括降低融资成本、优化项目设计、落实“一园一策”政策、坚持定制化招商路线等
医疗垃圾属于危险废物,焚烧后的飞灰同样存在最后稳定化的问题,国际上通用的处理方法主要是填埋和基础回填。通过对使用改性粉煤灰胶凝材料对医疗焚烧飞灰的稳定化处理效果研究,探讨医疗焚烧飞灰再利用的可行性和影响因素。
目的探讨糖尿病合并尿路感染患者病原菌构成及对抗菌药物耐药性,为临床抗感染合理用药提供科学指导。方法选取2017年1月～2019年12月我院糖尿病合并尿路感染患者337例,收集其清洁中段尿实施细菌分离培养与菌株鉴定,并实施药敏试验分析各菌种对各类抗菌药物耐药性。结果 337例患者清洁中段尿标本经培养后分离出337株病原菌,以革兰氏阴性杆菌为主,所占比例为75.96%（256/337）,其次为革兰氏阳
＜正＞问题与观点李志刚:《全国法院民商事审判工作会议纪要》（以下简称《纪要》）对公司法第十六条的内涵和效力的发展与拓展,在实务界产生重大影响,将产生一系列公司对外担保无效的案件。对于担保无效的责任问题,《纪要》第20条规定:"担保合同无效,债权人请求公司承担担保责任的,人民法院不予支持,但可以按照担保法及有关司法解释关于担保无效的规定处理。公司举证证明债权人明知法定代表人超越权限或者机关决议系伪造
＜正＞ 在英国悠久的历史上,海军一直被看成是国家武装力量中最主要的军种。今天,英国海军无论在数量上还是质量上都远远超过欧洲的其它北约国家。海军编制与作战使命设在诺沃德的海军参谋部是英国海军的最高军事指挥机构,海军参谋长对海军实施直接领导,实际上履行海军总司令的职责。归他管辖的有海军舰队司令部、海军航空兵司令部、海军陆战队司令部、英
针对超大深基坑支护方案选择问题，以洛阳龙门站综合交通枢纽北广场工程为依托，建立超大深基坑支护方案指标评价体系，采用层次分析法和熵权法计算指标组合权重，利用模糊综合评价法选出合理的支护形式.运用Midas-GTS NX建立有限元模型，结合数值模拟和现场监测，分析在该支护形式下，基坑施工过程中土体和支护结构的变形规律.研究结果表明：通过计算确定基坑北侧、东侧和西侧采用放坡+土钉墙支护、南侧采用灌注桩+
二战后,为保持应对全球或地区威胁的能力,美国向一些国家长期部署军事基地并派驻军事人员。然而,冷战后的国际环境已从应对传统国家或国家联盟间高强度的对抗,逐渐转向应对恐怖主义、大规模杀伤性武器扩散及地区冲突等问题。面对这一国际环境转变,美国海外军事存在对驻在国的国内影响也随之上升,但是当前关于其促使驻在国更安全还是更不安全这一问题,学界还缺少明确的共识。为此,本研究构建了美国海外军事基地与驻在国国内政