一种大规模培养与提取B群脑膜炎球菌蛋白抗原的简化方法及其检定

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:painangel
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本文首次报导改变国际上一般方法——将培养液经几次高速离心去菌体及超滤浓缩上清,用无离子去污剂(Brij 96)与三羟甲基氨基甲烷——乙二胺四乙酸二钠进行处理上清,以便选择性的溶解脂多糖(LPS)。再二次超速离心浓缩。而采用50万ml发酵罐大量培养B群15型及2b型二株无荚膜变异株再经连续离心机(Continuous Separotor)去上清,改由菌体而不是由上清提取蛋白抗原,从而免去用去污剂处理的繁琐工艺,此法所获蛋白抗原其LPS含量较原法为低。

蛋白抗原所作各项检定结果如下:按Lowry法测蛋白含量,其产量较高,应用测定二酮-3-脱氧辛糖酸(KDO)及电泳后银染方法,测LPS含量不超过规程要求(150µgLPS/mg蛋白);免疫小鼠血清ELISA滴度均具有型特异的高滴度,有的较原法为高,此外,豚鼠、小鼠毒性试验及家兔热原质试验符合规程要求。根据上述结果在国内是一种可行的候选方法。

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