【摘 要】
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利用RT-PCR技术,将狂犬病病毒株ERA株糖蛋白胞外区基因分两段进行扩增,经克隆与序列分析,两片段大小分别为523,381 bp,各编码174,127个氨基酸,分子量分别为19.7,14.5 kDa。在
【机 构】
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河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室河南省动物免疫学重点实验室
【基金项目】
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河南省科技攻关项目（082102130006）, 国家高技术研究发展计划（“863”）项目（2007AA100606）
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利用RT-PCR技术,将狂犬病病毒株ERA株糖蛋白胞外区基因分两段进行扩增,经克隆与序列分析,两片段大小分别为523,381 bp,各编码174,127个氨基酸,分子量分别为19.7,14.5 kDa。在原核表达载体pET-43a中分别克隆了这两段糖蛋白基因,将重组质粒转化到表达菌BL21（DE3）中,经SDS-PAGE电泳分析,在分子量约为94,89kDa处分别出现新蛋白带,和预期的目的蛋白的分子量相符。两重组蛋白主要以可溶形式表达,利用Ni2＋亲和层析柱纯化了蛋白,纯度大于95%。Western-Bl
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