pPIC3．5K／Thanatin-（G8S2）-PPA毕赤酵母表达载体的构建和表达

来源 :浙江理工大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yoclin

【摘要】

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将掌叶半夏凝集素和死亡素的融合基因thanatin-linker-ppa定向连接到pPIC3．5K，构建酵母表达载体pPIC3．5K／Thanatin-（G8S2）-PPA并进行序列分析，经SalI单酶切线性化后电转化到GSll5毕

【作者】

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刘学锋吕正兵汪波徐涛

【机构】

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浙江理工大学生命科学学院

【出处】

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浙江理工大学学报

【发表日期】

：

2012年6期

【关键词】

：

掌叶半夏凝集素死亡素 pPIC3.5K MTT PPA Thanatin pPIC3. 5K MTT

【基金项目】

：

国家自然科学基金（30772712）

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将掌叶半夏凝集素和死亡素的融合基因thanatin-linker-ppa定向连接到pPIC3．5K，构建酵母表达载体pPIC3．5K／Thanatin-（G8S2）-PPA并进行序列分析，经SalI单酶切线性化后电转化到GSll5毕赤酵母感受态细胞中，PCR鉴定后在含有G418抗性的YPD平板筛选高拷贝重组子。利用甲醇在BMMY培养基中诱导表达融合蛋白，经SDS-PAGE和Westernbloting分析显示获得分子量约31kD的融合蛋白，融合蛋白经纯化后MTT分析其抗肿瘤活性，结果显示融合蛋白具有显著的

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