【摘 要】
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目的:探究间充质干细胞外泌体对脑内小胶质细胞极化和炎症因子释放的影响及其机制.方法:收集体外培养的间充质干细胞上清,超高速冷冻离心获取外泌体.采用纳米颗粒系统和透射电子显微镜分别检测外泌体粒径大小、形态结构和功能完整性.通过免疫荧光、ELISA和细胞流式等方式检测LPS刺激下,外泌体对BV2细胞的表型极化和炎症因子释放的影响.采用Western Blot法检测间充质干细胞外泌体对BV2细胞JAK1/STAT3通路活化的影响.结果:(1)间充质干细胞分泌的外泌体粒径大小主要介于40-100 nm,透射电镜显
【机 构】
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广东医科大学附属医院干细胞研发与临床转化中心 广东湛江524001
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目的:探究间充质干细胞外泌体对脑内小胶质细胞极化和炎症因子释放的影响及其机制.方法:收集体外培养的间充质干细胞上清,超高速冷冻离心获取外泌体.采用纳米颗粒系统和透射电子显微镜分别检测外泌体粒径大小、形态结构和功能完整性.通过免疫荧光、ELISA和细胞流式等方式检测LPS刺激下,外泌体对BV2细胞的表型极化和炎症因子释放的影响.采用Western Blot法检测间充质干细胞外泌体对BV2细胞JAK1/STAT3通路活化的影响.结果:(1)间充质干细胞分泌的外泌体粒径大小主要介于40-100 nm,透射电镜显示外泌体形态呈典型膜性“杯盘”状结构;(2)流式结果表明,相比于对照组,LPS组能显著激活M1型小胶质细胞表面标志物CD11b和M2型小胶质细胞表面标志物CD206的表达,而经外泌体处理,CD11b的表达显著被抑制,CD206显著升高.同时ELISA结果证实,相比于LPS组,外泌体组分泌的促炎症因子(IL-1β、IL-6)和NO水平显著降低(P＜0.05),抗炎因子(IL-10)显著升高(P＜0.05);(3)间充质干细胞外泌体显著提高了BV2细胞JAK1/STAT3通路的磷酸化水平.结论:间充质干细胞外泌体通过激活JAK1/STAT3通路有效促进脑内小胶质细胞M1型向M2型极化.
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