【摘 要】
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目的对单纯疱疹病毒Ⅰ型扩增子质粒装载脑啡肽基因,并进行包装和扩增后,评价其在疼痛的转基因治疗上的作用.方法将pCMVHPPE质粒中的人前脑啡肽原基因插入单纯疱疹病毒Ⅰ型扩
【机 构】
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中南大学湘雅医院麻醉科,中南大学湘稚医院麻醉科,中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室,武汉市
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划);
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目的对单纯疱疹病毒Ⅰ型扩增子质粒装载脑啡肽基因,并进行包装和扩增后,评价其在疼痛的转基因治疗上的作用.方法将pCMVHPPE质粒中的人前脑啡肽原基因插入单纯疱疹病毒Ⅰ型扩增子质粒pHSVIRESlacZ,再用单纯疱疹病毒温敏株辅助在BHK-21细胞中包装、扩增,通过检测lacZ的表达反映扩增子病毒滴度.结果酶切鉴定证实重组子构建成功,重组扩增子质粒的包装、扩增由BHK-2l细胞的形态变化和X-gal原位检测载体lacZ的表达证实,扩增子假型病毒滴度达1×106TU/ml.结论本研究构建、包装、扩增的携带外源脑啡肽基因的假型病毒有较高感染性,这种扩增子病毒可作为疼痛基因治疗的实验研究的有力工具.
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