尾型同源盒基因2过表达对人胃癌耐顺铂细胞SGC7901/DDP多药耐药性的影响

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目的 探讨尾型同源盒基因2(Cdx2)过表达对人胃癌耐顺铂细胞SGC7901/DDP的多药耐药性的影响.方法 将SGC7901/DDP细胞分为实验组[Cdx2过表达重组慢病毒载体(pCMA-Cdx2-HA)处理]、空载体组[慢病毒载体(pCMA-HA)处理]、对照组(不做处理)3组.MTT法检测各组SCC7901/DDP细胞对化疗药物的敏感性;流式细胞仪检测各组SGC7901/DDP细胞阿霉素的泵出蓄积量、细胞周期分布及凋亡情况;Western blot技术进一步检测Cdx2蛋白和多药耐药基因1(MDR1)的蛋白表达水平.组间比较采用方差分析.结果 SGC7901/DDP细胞感染慢病毒载体72 h后,转染效率达90%以上.实验组Cdx2蛋白的相对表达量为0.37±0.06,较空载体组的0.12 ±0.02和对照组的0.11±O.03明显升高,3组比较,差异有统计学意义(F=82.37,P<0.05).实验组SGC7901/DDP细胞对阿霉素、5-氟尿嘧啶和顺铂的半数凋亡浓度分别为(1.10±0.08) mg/L、(4.81 ±0.12) mg/L、(3.81 ±0.15)mg/L,均高于空载体组的(0.59±0.05)mg/L、(3.71±0.14) mg/L、(2.20 ±0.15) mg/L和对照组的(0.63±0.04) mg/L、(3.92±0.15) mg/L、(2.92 ±0.11)mg/L,3组比较,差异有统计学意义(F=158.75,98.06,188.78,P<0.05).实验组阿霉素的泵出率为18.20%±0.12%,高于空载体组的7.22%±0.09%和对照组的8.79%±0.11%,3组比较,差异有统计学意义(F=146.31,P<0.05).实验组G1期细胞的比例为52.2%±4.4%,明显低于空载体组的62.0%±5.0%和对照组的67.8%±3.3%;实验组S期的细胞比例为40.4%±1.5%,明显高于空载体组的25.6%±2.0%和对照组的21.8%±1.3%,3组细胞G1期和S期比较,差异均有统计学意义(F=17.08,236.83,P<0.05).实验组细胞凋亡率为7.6%±1.3%,明显低于空载体组的11.1%± 1.1%和对照组的10.8%± 1.0%,3组比较,差异有统计学意义(F=16.29,P<0.05).实验组中MDR1蛋白的表达量为1.85 ±0.18,高于空载体组的1.12 ±0.08和对照组的1.02 ±0.09,3组比较,差异有统计学意义(F=76.22,P<0.05).结论 Cdx2基因的过表达可降低胃癌耐顺铂细胞SGC7901/DDP对化疗药物的敏感性,降低化疗药物在胃癌细胞内的蓄积浓度,增强胃癌多药耐药细胞的耐药性。

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