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目的 制备高效、低毒的抗肝癌单链免疫毒素.方法将人突变型肿瘤坏死因子α(mTNF α)与人源化抗肝癌单链抗体hscFv25基因连接,构建pGEX4T-1/hscFv25-mTNFα融合蛋白原核表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化目的蛋白,经western blot鉴定之后,进行荷肝癌(SMMC-7721)裸鼠体内初步抑瘤实验,并对治疗后裸鼠肿瘤组织进行抗TNF α的免疫组织化学染色.结果原核表达载体pGEX4T 1/hscFv25-mTNFα融合蛋白的表达量占细菌总蛋白的12%,hscFv25-mTNFα治疗组对荷肝癌裸鼠的有效率为5/5,其中2/5为完全缓解,3/5为部分缓解,疗效明显高于mTNF α对照组(F=8.70,P＜0.05),治疗组裸鼠的肝、肺等组织中未见转移性病灶,经hscFv25-mTNF α治疗后的肿瘤组织,呈TNF α弥漫阳性反应,阳性颗粒主要位于瘤细胞的胞质中.结论 hscFv25-mTNF α是高效、低毒的抗肝癌单链免疫毒素。