端粒酶催化亚单位和猿猴病毒40大T抗原致人脐静脉内皮细胞永生化

来源 :中华心血管病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：litang007

【摘要】

：

目的用端粒酶催化亚单位(hTERT)和猿猴病毒40大T抗原(SV40大T)异位表达建立永生化人脐静脉内皮细胞系. 方法构建含有hTERT和SV40大T cDNA片段的逆转录病毒载体,转染人原代脐

【作者】

：

边昶赵葵童国新朱永良陈鹏

【机构】

：

310009,浙江大学医学院附属第一医院核医学科,浙江省杭州市第一医院心内科,310009

【出处】

：

中华心血管病杂志

【发表日期】

：

2005年2期

【关键词】

：

内皮血管永生化细胞

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目的用端粒酶催化亚单位(hTERT)和猿猴病毒40大T抗原(SV40大T)异位表达建立永生化人脐静脉内皮细胞系. 方法构建含有hTERT和SV40大T cDNA片段的逆转录病毒载体,转染人原代脐静脉内皮细胞,连续传代培养.通过细胞免疫组织化学观察、Western blot分析hTERT和SV40大T抗原表达、PCR-ELISA检测端粒酶活性、ELISA分析内皮特异性E-选择素和RT-PCR测定内皮细胞脂肪酶进行细胞形态学和功能学鉴定.结果转染的人脐静脉内皮细胞为扁平多角形,呈单层铺路石状镶嵌排列.有Ⅷ因子

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